पेनिसिलिन जी सक्रिय गुणन के चरण के दौरान पेनिसिलिन-अतिसंवेदनशील सूक्ष्मजीवों के खिलाफ जीवाणुनाशक है। यह कोशिका-दीवार म्यूकोपेप्टाइड के जैवसंश्लेषण को रोककर कार्य करता है। यह पेनिसिलिनेज़-उत्पादक बैक्टीरिया के खिलाफ सक्रिय नहीं है, जिसमें स्टेफिलोकोसी के कई उपभेद शामिल हैं।
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