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एनियन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी द्वारा वाणिज्यिक κ-कैसिइन ग्लाइकोमैक्रोपेप्टाइड से फेनिलएलनिन अशुद्धियों का चयनात्मक निष्कासन

नाकानो टी और ओज़िमेक एल

मीठे मट्ठे में पाया जाने वाला बोवाइन κ-कैसिइन ग्लाइकोमैक्रोपेप्टाइड (GMP) एक 64 एमिनो एसिड अवशेष फॉस्फोराइलेटेड ग्लाइकोपेप्टाइड है। क्योंकि इसमें फेनिलएलनिन सहित सुगंधित एमिनो एसिड की कमी होती है, इसलिए GMP को फेनिलकेटोनुरिया से पीड़ित रोगियों के लिए एमिनो एसिड का एक महत्वपूर्ण आहार स्रोत माना जाता है। हालाँकि, मानव उपभोग के लिए फेनिलएलनिन-मुक्त GMP की तैयारी के बारे में बहुत कम जानकारी उपलब्ध है। इसलिए, यह अध्ययन डायथाइलैमिनोइथाइल (DEAE)-सेफसेल पर आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी द्वारा व्यावसायिक रूप से उपलब्ध कच्चे GMP से फेनिलएलनिन युक्त अशुद्धियों को हटाने के लिए किया गया था। परिणामों ने प्रदर्शित किया कि फेनिलएलनिन युक्त प्रोटीन या पेप्टाइड्स कॉलम से बंधते नहीं हैं, जबकि कुल पुनर्प्राप्त सियालिक एसिड का 93% हिस्सा बनाने वाले अधिकांश GMP कॉलम से बंध सकते हैं। शुद्ध GMP, जो कच्चे GMP के औसत शुष्क भार का 43% था, में फेनिलएलनिन का पता न लगाने योग्य स्तर था। विश्लेषण और सेल्यूलोज एसीटेट वैद्युतकणसंचलन ने दिखाया कि शुद्ध किया गया GMP उच्च सियालिक एसिड सामग्री (औसत 15.5% शुष्क भार) वाला उत्पाद है। सेफ़ैक्रिल एस-100 पर जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफ़ी और सुपरडेक्स 75 पर आकार बहिष्करण HPLC ने हमारे पिछले निष्कर्षों की पुष्टि की कि GMP मोनोमर्स समुच्चय बनाते हैं और एकल शिखर के रूप में निस्पंदन करते हैं, जिसका निस्पंदन आयतन डिमेरिक β-लैक्टोग्लोब्युलिन (36.6 kDa) के निस्पंदन आयतन के करीब होता है। यह निष्कर्ष निकाला गया कि DEAE-सेफ़सेल क्रोमैटोग्राफ़ी का उपयोग करके फेनिलएलनिन अशुद्धियों को चुनिंदा रूप से हटाकर GMP की कच्ची तैयारी को अत्यधिक परिष्कृत किया जा सकता है।

अस्वीकृति: इस सारांश का अनुवाद कृत्रिम बुद्धिमत्ता उपकरणों का उपयोग करके किया गया है और इसे अभी तक समीक्षा या सत्यापित नहीं किया गया है।