जर्नल ऑफ बैक्टीरियोलॉजी एंड पैरासिटोलॉजी

अमूर्त

ब्रुगिया मैलेई में भ्रूणजनन के दौरान वोलबैचिया को स्थानीयकृत करने के लिए इन-सीटू हाइब्रिडाइजेशन का उपयोग

दाओजुन जियांग, पीटर यू. फिशर और गैरी जे.वेइल

वोलबैचिया इंट्रासेल्युलर बैक्टीरिया हैं जो अधिकांश फाइलेरिया नेमाटोड में विकास और प्रजनन के लिए आवश्यक हैं। फाइलेरिया जीव विज्ञान में वोलबैचिया की भूमिका को बेहतर ढंग से समझने के लिए नए दृष्टिकोणों की आवश्यकता है। फ्लोरोसेंट इम्यूनोहिस्टोलॉजी का उपयोग करने वाले हाल के अध्ययनों ने ब्रुगिया मैलेई के शुरुआती भ्रूणों में वोलबैचिया के असममित पृथक्करण का खुलासा किया, और यह वयस्क कृमियों में वोलबैचिया के सीमित वितरण को समझाने में मदद करता है। हालाँकि, भ्रूण विकास के अंतिम चरणों में या संक्रामक लार्वा (L3) में वोलबैचिया का वितरण काफी हद तक अज्ञात है। इस अध्ययन में हमने बी. मैलेई में भ्रूणजनन और रूपजनन के दौरान वोलबैचिया और वोलबैचिया जीन अभिव्यक्ति को स्थानीयकृत करने के लिए इन सीटू हाइब्रिडाइजेशन (ISH) के उपयोग का पता लगाया है।

16S rRNA जांच के साथ ISH ने B. malayi मादा ऑर्म्स के पार्श्व डोरियों, अंडकोशिकाओं और भ्रूणों में वोलबैचिया का पता लगाया। यह उन पिछले अध्ययनों के अनुरूप था, जिन्होंने इम्यूनोहिस्टोलॉजी द्वारा वोलबैचिया का पता लगाया था। वोलबैचिया सरफेस प्रोटीन जीन (wsp) और वोलबैचिया हीम बायोसिंथेटिक पाथवे जीन (hemE) के लिए जांच के साथ ISH ने दिखाया कि ये जीन शुरुआती भ्रूणों में दृढ़ता से व्यक्त किए गए थे, लेकिन बाद के चरण के भ्रूणों ("कॉमा", "प्रेट्ज़ेल", या फैला हुआ अंतर्गर्भाशयी माइक्रोफ़िलारिया) में नहीं। 16S rRNA जांच के साथ ISH का उपयोग करके B. malayi भ्रूणों में वोलबैचिया के वितरण का एक विस्तृत अध्ययन प्रारंभिक भ्रूणों (मोरुला) में वोलबैचिया के असममित पृथक्करण को प्रलेखित करता है और दिखाता है कि वोलबैचिया केवल बाद के चरण के भ्रूणों ("कॉमा" चरण या बाद में) में हाइपोडर्मल कॉर्ड अग्रदूत कोशिकाओं में मौजूद थे। रूपजनन के दौरान वोलबैचिया का उत्तरोत्तर प्रतिबंधित स्थानीयकरण यह समझा सकता है कि क्यों L3 में जननांग प्राइमोर्डियम से वोलबैचिया अनुपस्थित हैं।

फाइलेरिया भ्रूण विकास के दौरान और कृमि के जीवन चक्र के दौरान वोलबैचिया वितरण और जीन अभिव्यक्ति नाटकीय रूप से भिन्न होती है। वोलबैचिया की ऊतक-विशिष्ट जनसंख्या गतिशीलता को समझने और यह पता लगाने के लिए अतिरिक्त शोध की आवश्यकता है कि नेमाटोड होस्ट से संकेत इन जीवाणुओं में वृद्धि, वितरण और जीन अभिव्यक्ति को कैसे प्रभावित कर सकते हैं।