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पुनः संयोजक SALL4B द्वारा लक्ष्य जीन अभिव्यक्ति को सक्रिय करना: एक बहुशक्तिशाली स्टेम सेल मार्कर

मेंगरू युआन, यूं वांग, झिहुआ रेन, वेई दाई और योंगपिंग जियांग

SALL4 एक महत्वपूर्ण प्रतिलेखन कारक है जो हेमाटोपोइएटिक स्टेम कोशिकाओं के विस्तार का समर्थन करता है। कई प्रकार के ल्यूकेमिया में SALL4 अभिव्यक्ति भी अनियंत्रित होती है। हाल के अध्ययनों से पता चलता है कि SALL4B, SALL4 का एक प्रमुख आइसोफॉर्म, अनुवाद-पश्चात तंत्र द्वारा भारी रूप से संशोधित किया जाता है और ये संशोधन उनकी स्थिरता, उपकोशिकीय स्थानीयकरण और प्रतिलेखन गतिविधियों के लिए महत्वपूर्ण हैं। स्टेम सेल स्व-नवीकरण और विस्तार का समर्थन करने में SALL4B के महत्व को देखते हुए, हमने बैकुलोवायरस अभिव्यक्ति वेक्टर प्रणाली का उपयोग करके SALL4B प्राप्त करने के लिए बड़े पैमाने पर अभिव्यक्ति और शुद्धिकरण प्रक्रिया को अनुकूलित किया। पुनः संयोजक TAT-SALL4B को मूल स्थितियों के तहत निकल आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी द्वारा कुशलतापूर्वक शुद्ध किया गया था । इम्यूनो-ब्लॉटिंग ने पुष्टि की कि पुनः संयोजक SALL4B अत्यधिक व्यक्त और शुद्ध किया गया था। शुद्ध किए गए TAT-SALL4B की जैविक गतिविधि का परीक्षण करने के पहले चरण के रूप में, हमने जांच की कि क्या TATSALL4B, सीधे संस्कृति माध्यम में पूरक, प्रोटीन पारगमन प्रक्रिया के माध्यम से कोशिकाओं में प्रवेश करने में सक्षम था। फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी से पता चला कि पुनः संयोजक TAT-SALL4B विशेष रूप से सांद्रता और समय पर निर्भर तरीके से नाभिक में स्थानीयकृत होता है। रिपोर्टर जीन परख से पता चला कि शुद्ध TAT-SALL4B प्रोटीन ने OCT4 जीन प्रमोटर को सक्रिय किया, जो दर्शाता है कि पुनः संयोजक SALL4B विवो में ट्रांसक्रिप्शनल रूप से सक्रिय था। संयुक्त रूप से, हमारे परिणाम बताते हैं कि TAT-SALL4B हेमेटोपोएटिक स्टेम कोशिकाओं के एक्स विवो विस्तार का समर्थन करने के लिए एक आशाजनक कारक प्रदान कर सकता है ।

अस्वीकृति: इस सारांश का अनुवाद कृत्रिम बुद्धिमत्ता उपकरणों का उपयोग करके किया गया है और इसे अभी तक समीक्षा या सत्यापित नहीं किया गया है।