जैव रसायन एवं विश्लेषणात्मक जैव रसायन

अमूर्त

इरी रेशमकीट, फिलोसामिया रिकिनी (लेपिडोप्टेरा: सैटुनिडे) के पांचवें इंस्टार लार्वा में प्रोटीन और एंजाइम के स्तर पर कम तापमान के प्रभाव पर समय-समय पर अध्ययन

अनिता सिंह, विवेक कुमार गुप्ता, निकहत जमाल सिद्दीकी, शैली तिवारी, अनिता गोपेश और बेचन शर्मा

लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज (LDH; EC 1.1.1.27) और मैलेट डिहाइड्रोजनेज (MDH; EC 1.1.1.37) एरी रेशमकीट, फिलोसामिया रिकिनी के ऊर्जा चयापचय में शामिल एंजाइम हैं। हालाँकि, एरी रेशमकीट के विभिन्न ऊतकों में उनके स्तरों पर कम तापमान के संपर्क के प्रभाव के बारे में कोई पिछला अध्ययन रिपोर्ट नहीं किया गया है। वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य तीन प्रमुख ऊतकों (हीमोलिम्फ, रेशम ग्रंथि और वसा शरीर) के प्रोटीन और ऊर्जा चयापचय एंजाइमों के स्तर पर 5वें इंस्टार पी. रिकिनी के कम तापमान (~ 10 डिग्री सेल्सियस) के संपर्क के समय-समय पर होने वाले प्रभावों का पता लगाना था। अरंडी के तेल के पौधे (रिकिनस कम्युनिस) की ताजा पत्तियों पर पाले गए इरी रेशमकीट लार्वा को 4 समूहों में विभाजित किया गया: एक नियंत्रण समूह जिसे 25 ± 2°C पर पाला गया और साथ ही तीन प्रयोगात्मक समूह जिन्हें 10 ± 1°C पर पाला गया, जिनमें से प्रत्येक में 50 लार्वा थे, अलग-अलग अवधियों (2, 4 और 7 दिन) के लिए। 9000 ग्राम पर ऊतक होमोजीनट को सेंट्रीफ्यूज करके सेल मुक्त अर्क तैयार किया गया और जैव रासायनिक आकलन (कुल प्रोटीन सामग्री, लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज और मैलेट डिहाइड्रोजनेज गतिविधियों) के लिए इस्तेमाल किया गया। आइसोजाइम विश्लेषण के लिए, होमोजीनेट्स (20% w/v) का एक और सेट बफर (0.2 M ट्रिस HCl, pH 7.0) में तैयार किया गया जिसमें 0.2 M सुक्रोज और 10 mM EDTA था, और नेटिव-PAGE द्वारा विश्लेषण किया गया और उसके बाद गतिविधि धुंधलापन किया गया। लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज और मैलेट डिहाइड्रोजनेज की गतिविधियों ने हीमोलिम्फ में महत्वपूर्ण कमी दिखाई, जबकि वसा निकायों में दोनों एंजाइमों ने गतिविधि में वृद्धि दिखाई। रेशम ग्रंथि में, लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज गतिविधि समान रूप से कम हो गई, जबकि मैलेट डिहाइड्रोजनेज गतिविधि सभी जोखिम अवधि में बढ़ गई। आइसोजाइम विश्लेषण ने उनकी अभिव्यक्ति प्रोफाइल में महत्वपूर्ण गड़बड़ी का खुलासा किया। कम तापमान के संपर्क में आने से हीमोलिम्फ में प्रोटीन सामग्री का संचय हुआ और रेशम ग्रंथि और वसा शरीर के ऊतकों में कमी आई। इस स्थिति के तहत वसा शरीर मुख्य ऊर्जा उत्पादक अंग के रूप में उभरा। लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज और मैलेट डिहाइड्रोजनेज ने सभी परीक्षण किए गए ऊतकों में केवल एक आइसोजाइम की उपस्थिति दिखाई। कम तापमान के प्रति लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज और मैलेट डिहाइड्रोजनेज का आइसोजाइम व्यवहार विभिन्न ऊतकों में भिन्न था। इन परिणामों ने सुझाव दिया कि इन एंजाइमों की अभिव्यक्ति और कार्यों में परिवर्तन कम तापमान पर लार्वा के अनुकूलन से जुड़ा हो सकता है।