जैवसमतुल्यता एवं जैवउपलब्धता जर्नल

अमूर्त

उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा मानव प्लाज्मा में विटामिन डी-2, विटामिन डी-3, और उनके 25-हाइड्रॉक्सी मेटाबोलाइट्स का एक साथ परिमाणीकरण

सैयद एन अल्वी, अहमद यूसुफ और मुहम्मद एम हम्मामी

मानव प्लाज्मा में विटामिन डी-2 (वीडी-2), विटामिन डी-3 (वीडी-3), 25-हाइड्रोक्सीविटामिन डी-2 [25 (ओएच) वीडी-2], और 25-हाइड्रोक्सीविटामिन डी-3 [25 (ओएच) वीडी-3] के एक साथ निर्धारण के लिए एक सरल और विश्वसनीय उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) विधि विकसित और मान्य की गई थी। प्लाज्मा के नमूनों को मेथनॉल और 2-प्रोपोनोल के मिश्रण से डीप्रोटीनाइज़ किया गया और हेक्सेन के साथ निकाला गया। वाष्पीकरण के बाद, अवशेषों को मेथनॉल: पानी (9.6: 0.4, v/v) में घोला गया, सेंट्रीफ्यूज किया गया और फिर ज़ोरबैक्स C18 कॉलम पर स्पष्ट घोल इंजेक्ट किया गया। मोबाइल चरण (ग्रेडिएंट इल्यूशन मोड) में मेथनॉल, एसिटोनिट्राइल और पानी (pH = 3.0) शामिल हैं; इल्यूएंट्स की निगरानी फोटोडियोड ऐरे डिटेक्टर (265 एनएम पर तरंग दैर्ध्य सेट) द्वारा की गई थी। प्लाज्मा में VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2, 25(OH) VD-3 की सांद्रता और IS के प्रति उनके शिखर क्षेत्र अनुपात के बीच संबंध 5 - 100 ng/mL की सीमा में रैखिक था। अंतर-दिन और अंतर-दिन परख के लिए भिन्नता के गुणांक सभी ≤ 9.7% और पूर्वाग्रह ≤ 13.1% थे। प्लाज्मा से VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2 और 25(OH) VD-3 की औसत निष्कर्षण वसूली सभी 80% से अधिक थी। स्वस्थ विषयों से प्राप्त प्लाज्मा में विटामिन डी के स्तर के निर्धारण के लिए विधि को लागू किया गया था। इसके अलावा, इसका उपयोग नैदानिक ​​प्रयोगशाला में सामने आई विभिन्न स्थितियों के तहत प्लाज्मा में VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2 और 25(OH) VD-3 की स्थिरता का आकलन करने के लिए किया गया था।