राठी धर्मेंद्र, थंकी माधवी, अग्रवाल रीना और आनंदजीवाला शीतल
वर्तमान शोधपत्र में हम बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन और गैलिक एसिड के एक साथ परिमाणीकरण और HPTLC का उपयोग करके β-सिटोस्टेरॉल के परिमाणीकरण के लिए TLC डेंसिटोमेट्रिक विधि के विकास और सत्यापन पर अपने काम की रिपोर्ट करते हैं। हमारे सर्वोत्तम ज्ञान के अनुसार, यह इस पौधे से HPTLC का उपयोग करके इन चार जैव सक्रिय यौगिकों अर्थात बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन और गैलिक एसिड के एक साथ परिमाणीकरण की पहली रिपोर्ट है। बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन और गैलिक एसिड का एक साथ परिमाणीकरण मेथनॉलिक और हाइड्रोलाइज्ड अर्क (2N HCl) से टोल्यूनि: एथिल एसीटेट: फॉर्मिक एसिड (6: 6: 1, v/v/v) की विलायक प्रणाली का उपयोग करके किया गया था। टोल्यूनि: मेथनॉल (9: 1, v/v) की विलायक प्रणाली का उपयोग करके पेट्रोलियम ईथर अर्क से β-सिटोस्टेरॉल की मात्रा निर्धारित की गई। सटीकता, दोहराव और शुद्धता के संदर्भ में ICH दिशानिर्देशों का उपयोग करके विधियों को मान्य किया गया। पतली परत क्रोमैटोग्राफी डेंसिटोमेट्रिक विधियाँ बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन, गैलिक एसिड और β-सिटोस्टेरॉल की विभिन्न सांद्रताओं के लिए क्रमशः 2.62-4.26, 0.35-2.5, 0.61-1.83, 1.14-1.57 और 0.15-0.52 की सीमा में इंट्रा-डे के लिए RSD के साथ सटीक पाई गईं और इंटरडे के लिए 1.90-4.27, 0.85-3.05, 0.97-1.45, 0.58-1.27 और 0.26-0.61 की सीमा में। बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन और गैलिक एसिड के लिए रैखिकता सीमा समान (160 -720 एनजी/स्पॉट) पाई गई, जिसमें सहसंबंध गुणांक (आर-मान) क्रमशः 0.999, 0.997, 0.998 और 0.996 थे। β-सिटोस्टेरॉल के लिए रैखिकता सीमा 80-480 एनजी/स्पॉट थी, जिसमें सहसंबंध गुणांक (आर-मान) 0.995 था। बर्गेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन, गैलिक एसिड और β-सिटोस्टेरॉल के लिए यंत्रवत् परिशुद्धता क्रमशः 3.39, 3.36, 3.05, 1.20 और 0.85 (% RSD) थी। दोनों यौगिकों के लिए तीन अलग-अलग स्तरों पर रिकवरी अध्ययन आयोजित करके विधि की सटीकता की जाँच की गई और प्राप्त औसत प्रतिशत रिकवरी क्रमशः बर्जेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन, गैलिक एसिड और -सिटोस्टेरॉल के लिए 100.38, 101.45, 102.38, 99.9 और 99.92% थी। बर्जेनिन, (+)-कैटेचिन और गैलिक एसिड की मात्रा क्रमशः 0.22, 0.063 और 0.25% w/w थी जबकि गैलिसिन पता लगाने योग्य मात्रा में नहीं थी। विकसित विधि ने बर्जेनिन, (+)-कैटेचिन, गैलिसिन और गैलिक एसिड के एक साथ परिमाणीकरण की अनुमति दी और अर्क के अन्य घटकों से अच्छा रिज़ॉल्यूशन और पृथक्करण दिखाया और इसे सरल, सटीक, विशिष्ट, संवेदनशील और सटीक पाया गया।