फार्माकोजेनोमिक्स और फार्माकोप्रोटिओमिक्स जर्नल

अमूर्त

लीशमैनिया यूकेरियोटिक ट्रांसलेशन इनिशिएशन फैक्टर 4A को लक्ष्य करके आभासी और जैव रासायनिक जांच द्वारा नवीन लीशमैनिसाइडल अणुओं का चयन और जैव रासायनिक लक्षण वर्णन

योसेर ज़िना अब्देलक्रिम

लीशमैनियासिस के उपचार के लिए नए छोटे और सक्रिय अणुओं की पहचान एक शोध प्राथमिकता है। यहाँ, हम संभावित दवा लक्ष्य के रूप में लीशमैनिया इन्फैंटम इनिशिएशन फैक्टर 4A (LieIF) को लक्षित करने वाले छोटे अणुओं की पिछली सिलिको जांच और वर्चुअल स्क्रीन पर विस्तार करते हैं। LieIF RNA हेलिकेस के DEAD-बॉक्स परिवार से संबंधित है। DEAD-बॉक्स प्रोटीन में डंबल आकार के साथ एक अत्यधिक संरक्षित कोर संरचना होती है जिसमें दो, जुड़े हुए डोमेन होते हैं जो पुनः संयोजक
प्रोटीन A (RecA) के संरचनात्मक समरूपता के साथ होते हैं। यह कोर संरचना एक ATP-निर्भर RNA-बाइंडिंग आत्मीयता, एक RNA-निर्भर ATPase गतिविधि और एक ATP-निर्भर RNA अनवाइंडिंग गतिविधि प्रदान करती है। हमने LieIF को बाधित करने वाले अणुओं की स्क्रीनिंग के लिए माइक्रोटिटर प्लेटों में एक रंगमिति परख स्थापित करने के लिए ATPase गतिविधि का उपयोग किया। हमने LieIF पर उन साइटों से जुड़ने की उनकी क्षमता के लिए वर्चुअल स्क्रीनिंग द्वारा पहले से पहचाने गए सैकड़ों अणुओं की स्क्रीनिंग की जो एंजाइमेटिक गतिविधि के लिए महत्वपूर्ण थे। हमने एक दिलचस्प अवरोधक की खोज की: 6-α/β-एमिनोकोलेस्टेनॉल जिसका
IC50 मान 150 ± 15 μM LieIF के लिए है। यह यौगिक LieIF की RNA हेलिकेज़ गतिविधि को भी बाधित करता है। हेलिकेज़ परख और व्यक्तिगत RecA-जैसे डोमेन और अन्य प्रोटीन के साथ ATPase प्रतिस्पर्धा प्रयोगों से संकेत मिलता है कि LieIF पर कई बंधन स्थल हैं, और प्राथमिक बंधन स्थल डोमेन 1 पर है जिसमें संरक्षित RNA-बंधन रूपांकन शामिल हैं। 6-α/β-एमिनोकोलेस्टेनॉल (6-α-एमिनोकोलेस्टेनॉल और 6-केटोकोलेस्टेनॉल) के दस में से दो पहचाने गए रासायनिक एनालॉग ने LieIF की ATPase गतिविधि पर अवरोधक प्रभाव दिखाया। स्तनधारी eIF4A के साथ समान अवरोधक प्रभाव देखे गए, लेकिन अलग-अलग प्रतिक्रिया प्रोफाइल के साथ। तीनों अणुओं ने प्रोमास्टिगोट्स और एल. इन्फैंटम परजीवियों के एमास्टिगोट्स के खिलाफ एंटी-लीशमैनियल गतिविधि दिखाई, और उन्होंने मैक्रोफेज के प्रति गैर-महत्वपूर्ण विषाक्तता दिखाई। यह अध्ययन एक दवा लक्ष्य के रूप में LieIF की मान्यता की दिशा में पहला कदम है। यह लीशमैनिया और स्तनधारी eIF4A प्रोटीन के बीच जैव रासायनिक अंतर को प्रदर्शित करता है, विशेष रूप से ATPase परख में जो दर्शाता है कि रोकाग्लामाइड दोनों प्रोटीन को अलग-अलग तरीके से प्रभावित करता है। निष्कर्ष निकालने के लिए, यह कार्य एक आशाजनक लीशमैनिसाइडल अणु प्रदान करता है: 6-एमिनोकोलेस्टेनॉल जिसका IC50 मान इंट्रासेल्युलर एमास्टिगोट्स पर 1 μM से कम है, जिसमें थोड़ी विषाक्तता है और 20 से अधिक चयनात्मकता सूचकांक है। 6-एमिनोकोलेस्टेनॉल एक आशाजनक एंटी-लीशमैनिया अणु है जो आगे की जांच के योग्य है।