जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

निलंबन में mRNA प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं से मजबूत, कुशल और शुद्ध प्रेरित मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं का उत्पादन

रजनीश वर्मा, पोर्नपुन सेंगमुआंग, तनाबोडी पेउहा, जूली डी मेंडोज़ा, रोत्सारिन नारंग, नफापत्सोर्न बोंडी, सर्गेई दिमित्रिएव्स, पॉल माइकल कोलियर

मेसेनकाइमल स्टेम सेल (MSCs) कई आशाजनक नैदानिक ​​परीक्षणों में शामिल हैं जो बेहद जटिल बीमारियों से निपटते हैं। कई कारक इन नैदानिक ​​परीक्षणों में सुरक्षा का निर्धारण कर रहे हैं जैसे कि उपचारों में उपयोग किए जाने वाले ऊतक-व्युत्पन्न MSCs सेल आबादी की शुद्धता। साथ ही, इंजेक्ट किए गए MSCs की प्रभावकारिता का परीक्षण निरंतर मार्गों पर प्रसार क्षमता और प्रजनन क्षमता के माध्यम से, आवेदन से पहले इन-विट्रो में किया जाना चाहिए। इसके अलावा, सफल सेलुलर थेरेपी और प्रत्यारोपण के लिए MSCs व्युत्पन्न के सही स्रोत को चुनने का महत्व। यह अध्ययन गैर-एकीकृत (mRNA) विधि का उपयोग करके स्वस्थ मानव दाता (पूर्ण आनुवंशिक परीक्षण से पहले) के प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (iPSC) से iMSCs की मजबूत पीढ़ी को प्रदर्शित करता है। इस रूपांतरण विधि में शामिल है (i) iMatrix के बिना निलंबन में iPSCs की आबादी को विभेदित करना, (ii) चरण (i) में विभेदित कोशिकाओं को कुछ समय के लिए वातानुकूलित MSC माध्यम की उपस्थिति में और दीर्घ अवधि के लिए संस्कृति में iMSC का उत्पादन करने के लिए पर्याप्त परिस्थितियों के तहत पारित करना, जिसमें एपिजेनेटिक मेमोरी का कोई संकेत नहीं है।

प्लुरिपोटेंट मार्कर अभिव्यक्ति (ऑक्ट-4, SSEA-4, Sox-2, Tra-1-60) का विश्लेषण फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप दृश्य मूल्यांकन के माध्यम से फ्लो साइटोमेट्री और इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री द्वारा पुष्टि की गई थी। पुरुष हैम्स्टर में iMSC आबादी के इन-विवो इंजेक्शन द्वारा कोई टेराटोमा विकसित नहीं किया गया था, जो iPSC के बिना संस्कृति में iMSCs की परिवर्तित शुद्धता और प्रतिरक्षा-मॉड्यूलेटिंग गुण की पुष्टि करता है। सेल चक्र और जीर्णता अध्ययनों के लिए, शुद्ध इन-विट्रो iMSCs का परीक्षण CD73, 90 और 105 अभिव्यक्ति विश्लेषण का उपयोग करके फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके किया गया और UC-MSC के साथ तुलना की गई। बाद में, iMSCs ने UC-MSCs के सापेक्ष कोन्ड्रोसाइट्स, ऑस्टियोसाइट्स और एडीपोसाइट्स के त्रि-विभेदन का प्रदर्शन किया, जो वयस्क MSCs का उपयोग करने की कमियों को संबोधित करना संभव बना सकता है और इस प्रकार विभिन्न नैदानिक ​​​​सेटिंग्स में भविष्य के उपयोग के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रदान कर सकता है।