जर्नल ऑफ माइक्रोबियल एंड बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी

अमूर्त

सिलिका कॉलम द्वारा शुद्धिकरण पर आधारित दो वाणिज्यिक विधियों का उपयोग करके यीस्ट कैंडिडा पैराप्सिलोसिस सेंसु स्ट्रिक्टो से आरएनए निष्कर्षण

रोड्रिगेज एम.एल., रोजा ए.सी. और ज्यूटुचोविच वी.एम.

जीन अभिव्यक्ति का अध्ययन करने के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले आरएनए की आवश्यकता होती है। विभिन्न आरएनए निष्कर्षण विधियों का वर्णन किया गया है, लेकिन विभिन्न तकनीकों और जैविक अध्ययन प्रजातियों के बीच आरएनए की गुणवत्ता और उपज भिन्न हो सकती है। आज तक, कैंडिडा जीनस यीस्ट से आरएनए के निष्कर्षण और शुद्धिकरण के लिए कोई मानकीकृत विधि नहीं है। इस विषय पर उपलब्ध कुछ शोधपत्र मुख्य रूप से फिलामेंटस कवक पर लागू होते हैं और मैनुअल या इन-हाउस आईवीडी विधियों पर आधारित निष्कर्षण तकनीकों के लिए खराब परिणाम उत्पन्न करते हैं। इसलिए इस अध्ययन का उद्देश्य दो वाणिज्यिक आरएनए निष्कर्षण और शुद्धिकरण प्रणालियों की तुलना सिलिका कॉलम (क्यूजेन और ज़ाइमो रिसर्च) का उपयोग करके कैंडिडा पैराप्सिलोसिस सेंसु स्ट्रिक्टो के साथ मॉडल जीव के रूप में करना था। इस यीस्ट की पहचान हाल के शोधपत्रों में मौखिक गुहा में दूसरी सबसे अधिक बार पृथक की जाने वाली कैंडिडा प्रजाति के रूप में की गई है। पिछले दशक में, यह बढ़ती हुई चिकित्सा रुचि का विषय रहा है क्योंकि यह वयस्कों और समय से पहले के नवजात शिशुओं दोनों में कैंडिडेमिया के मुख्य कारणों में से एक है। इस पृष्ठभूमि को देखते हुए, हम कैंडिडा पैराप्सिलोसिस सेंसु स्ट्रिक्टो ट्रांसक्रिप्टोम और पर्यावरण परिवर्तनों के अनुसार इसके बदलावों के अध्ययन को प्राथमिकता मानते हैं। इस प्रायोगिक अध्ययन में, 19 फंगल आइसोलेट्स को क्यूजेन का उपयोग करके और 17 आइसोलेट्स को ज़ाइमो रिसर्च का उपयोग करके संसाधित किया गया था। परिणाम बताते हैं कि बेहतर गुणवत्ता वाले आरएनए उत्पाद प्राप्त करने के लिए क्यूजेन लाइसिस बफर आरएलटी आवश्यक है।