जैवसमतुल्यता एवं जैवउपलब्धता जर्नल

अमूर्त

रैपिड इक्विलिब्रियम डायलिसिस (RED): मानव और चूहे के प्लाज्मा का उपयोग करके प्लाज्मा प्रोटीन बाइंडिंग के लिए एक इन-विट्रो हाई-थ्रूपुट स्क्रीनिंग तकनीक

जितेंद्र कुमार सिंह, अनंत सोलंकी, रीमा सी मनियार, देबरूपा बनर्जी और विकास एस शिरसथ

यह निर्धारित करना कि कोई अणु प्लाज्मा प्रोटीन से किस हद तक जुड़ता है, दवा विकास का एक महत्वपूर्ण चरण है क्योंकि प्लाज्मा-बद्ध दवा की मात्रा यौगिक खुराक, प्रभावकारिता, निकासी दर और दवा परस्परक्रियाओं की क्षमता को प्रभावित करती है। इसलिए प्लाज्मा में एक परीक्षण लेख के मुक्त (%Fu) और बंधे (%Bound) अंशों का निर्धारण एक महत्वपूर्ण पैरामीटर है, जिसे दवा की खोज और विकास की प्रक्रिया में नियमित रूप से निर्धारित किया जाता है। यह निर्धारण संतुलन डायलिसिस द्वारा सक्षम किया जाता है, जो प्लाज्मा में गैर-बद्ध दवा अंश के विश्वसनीय अनुमान के लिए एक स्वीकृत और मानक विधि है। हालाँकि यह पसंदीदा तरीका है, लेकिन संतुलन डायलिसिस ऐतिहासिक रूप से श्रम-गहन, समय लेने वाली, लागत-निषेधात्मक और स्वचालित करने में कठिन रहा है। LC-MS/MS का उपयोग करके एक रैपिड इक्विलिब्रियम डायलिसिस (RED) दवा-प्रोटीन बंधन परख एक नई तकनीक का उपयोग करके विकसित की गई थी, जिसके परिणामस्वरूप परख की सटीकता में काफी सुधार हुआ और गति का लाभ मिला। मानव और चूहे की प्रजातियों के प्लाज्मा में अपेक्षित प्रोटीन बंधन की एक श्रृंखला को कवर करने वाले यौगिकों के एक पैनल का परीक्षण किया गया। प्रीट्रीटेड प्लाज़्मा में अनबाउंड ड्रग की मात्रा का पता लगाने के लिए इलेक्ट्रो स्प्रे आयनीकरण के साथ इंटरफेस किए गए क्वाड्रुपल टेंडम मास स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके एक संवेदनशील और चयनात्मक विधि विकसित की गई थी। इस्तेमाल किए गए मोबाइल चरण एसीटोनिट्राइल में 0.1% फॉर्मिक एसिड थे: ग्रेडिएंट एचपीएलसी विधि के साथ पानी में 0.1% फॉर्मिक एसिड। ईएसआई मोड में संचालित मास स्पेक्ट्रोमीटर द्वारा दवाओं के अनबाउंड अंश का पता लगाया गया था। इसके अलावा, दस यौगिकों के एक सेट के डेटा की तुलना साहित्य मूल्यों से की गई थी। वर्णित विधि के साथ, दवा खोज वातावरण में पीपीबी के लिए अपेक्षाकृत बड़ी संख्या में यौगिकों की जांच करना संभव है।