जर्नल ऑफ माइक्रोबियल एंड बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी

अमूर्त

किण्वन में बैसिलस सबटिलिस एनआरआरएल 41270 द्वारा उत्पादित एक बाह्यकोशिकीय कम आणविक भार एस्टरेज़ का शुद्धिकरण, अमीनो एसिड अनुक्रमण और तापस्थिरता

पापागियानी एम और पापामाइकल ईएम

बैसिलस सबटिलिस NRRL 41270 किण्वन शोरबा में बाह्य कोशिकीय एस्टरेज गतिविधि 10 kDa से कम आणविक भार वाले एक छोटे प्रोटीन में पाई गई। शुद्धिकरण के बाद, फ्लोरेसिन डिब्यूटिरेट पर एस्टरेज गतिविधि का अनुमान 12 U/min/mg प्रोटीन था। एंजाइम संतृप्ति 5 μM सब्सट्रेट सांद्रता पर देखी गई। उत्पादित एस्टरेज ने ट्राइब्यूटिरिन को हाइड्रोलाइज किया। इसकी विशिष्ट गतिविधि का अनुमान 17.8 μmol एसिड रिलीज/मिनट/mg प्रोटीन था। छोटे प्रोटीन को आकार बहिष्करण क्रोमैटोग्राफी, SDS-PAGE और अमीनो एसिड अनुक्रमण के अधीन किया गया था। विश्लेषण ने निम्नलिखित अमीनो एसिड अवशेषों का एक अनुक्रम प्रकट किया: eevaetysfyhitphdystshispapvqffspap, जिसके अनुसार अणु में 34 अमीनो एसिड अवशेष और 3853 का परिकलित आणविक द्रव्यमान है, जो जेल निस्पंदन और SDS-PAGE परिणामों के अनुसार था। अनुक्रम आधारित विश्लेषण और जैव सूचना विज्ञान उपकरणों के उपयोग ने ज्ञात प्रोटीन के साथ कोई महत्वपूर्ण समानता नहीं दिखाई, जबकि एक मजबूत हाइड्रोफोबिक अणु का पता चला, जिसमें एन-टर्मिनल में α-हेलिकल संरचना थी, अणु का बाकी हिस्सा β-शीट-समृद्ध था। एंजाइम 60 डिग्री सेल्सियस पर 120 घंटे के ऊष्मायन के बाद मूल गतिविधि के 85% से अधिक बनाए रखने के साथ थर्मोस्टेबल प्रतीत हुआ। उत्पादक जीव और माइक्रो एंजाइम की विशेषताएं, एक जैव प्रौद्योगिकी के मामले में दिलचस्प जैव उत्प्रेरक का सुझाव देती हैं, जिस पर इसकी स्थिरता और उत्पादन विशेषताओं के संदर्भ में आगे शोध किया जाना चाहिए।