जर्नल ऑफ माइक्रोबियल एंड बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी

अमूर्त

जलमग्न और ठोस अवस्था किण्वन के तहत समुद्री एंडोफाइटिक एस्परगिलस प्रजाति ALAA-2000 से एल-एस्पैरेजिनेज का उत्पादन, शुद्धिकरण और लक्षण वर्णन

मर्वत मोर्सी अब्बास अहमद, नागेह अबो दहाब एफ, ताहेर ताहा एम और फरीद हसन एसएम

समुद्री नरम स्पंज एप्लाइसिना फिस्टुलरिस से प्राप्त सभी एंडोफाइटिक कवकों में से 72.2% एल-एस्पैरजिनेज का उत्पादन करने में सक्षम थे। सभी प्राप्त आइसोलेट्स में से, एस्परगिलस एसपी। ALAA-2000, विभिन्न कृषि अपशिष्टों के जलमग्न किण्वन (SMF) और ठोस अवस्था किण्वन (SSF) के तहत एंटीकैंसर एजेंट, L-एस्पैरजिनेज के लिए अति सक्रिय उत्पादक को निष्कर्षण प्रक्रिया के अनुकूलन के लिए चुना गया था; भौतिक-रासायनिक मापदंडों का अनुकूलन, जो SSF में L-एस्पैरजिनेज के उत्पादन को प्रभावित करता है और शुद्ध L-एस्पैरजिनेज मापदंडों का अनुकूलन। अधिकतम L-एस्पैरजिनेज गतिविधि 23.34 U/ml सोयाबीन से SSF के तहत 30 मिनट के लिए 40 °C और 150 rpm पर गर्म पानी के साथ और कार्बन स्रोत के रूप में ग्लूकोज और नाइट्रोजन स्रोत के रूप में एस्परजिन का उपयोग करके जलमग्न किण्वन के तहत 30.64 U/ml प्राप्त की गई। दो प्रकार के एल-एस्पेरेजिनेज (AYA-1 और AYA-2) को एस्परगिलस प्रजाति ALAA-2000 के कल्चर सुपरनैटेंट से अमोनियम सल्फेट अवक्षेपण और जेल निस्पंदन क्रोमैटोग्राफी (सेफैडेक्स G-200) के माध्यम से शुद्ध किया गया। एंजाइमों के आणविक भार 25 kDa (AYA-1) और 31 kDa (AYA-2) थे। शुद्ध किए गए L-एस्पेरेजिनेज के मापदंडों को AYA-1 (pH 6.0, 60 मिनट के लिए 30°C से 50°C पर स्थिर, प्रतिक्रिया समय 15 मिनट, और सब्सट्रेट सांद्रता 1.275 mg/ml) और AYA-2 एंजाइम (pH 10, 60 मिनट के लिए 30°C से 70°C पर स्थिर, प्रतिक्रिया समय 15 मिनट, और सब्सट्रेट सांद्रता 1.275 mg/ml) के लिए अनुकूलित किया गया था। जबकि मेटालोप्रोटीज़ के अवरोधक, चेलेटिंग एजेंट EDTA, का एल-एस्पैराजिनेज पर कोई प्रभाव नहीं था। इन निष्कर्षों से पता चलता है कि एल-एस्पैराजिनेज मेटालोप्रोटीज़ नहीं था।