जैव रसायन एवं विश्लेषणात्मक जैव रसायन

अमूर्त

बैसिलस सबटिलस द्वारा एंडोपॉलीगैलेक्टुरोनेज का उत्पादन, शुद्धिकरण और लक्षण वर्णन

नायब मुनीर, जावेद असद एम और हैदरी एसएच

पौधों की कोशिका भित्ति जटिल कार्बोहाइड्रेट जैसे सेल्यूलोज, हेमीसेल्यूलोज और पेक्टिन से बनी होती है। पेक्टिन जटिल कार्बोहाइड्रेट है जो ग्लाइकोसिडिक लिंकेज द्वारा जुड़े गैलेक्टुरोनिक एसिड इकाइयों से बना होता है। इस पेक्टिन के टूटने के लिए सूक्ष्मजीवों को कई अलग-अलग एंजाइमों की आवश्यकता होती है। पॉलीगैलेक्टुरोनेज एक पेक्टिनोलिटिक एंजाइम है जो पानी के योग से पॉलीगैलेक्टुरोनिक एसिड में α 1-4 ग्लाइकोसिडिक लिंकेज के हाइड्रोलिसिस को उत्प्रेरित करता है। पॉलीगैलेक्टुरोनेज के दो प्रकार हैं; एंडोपॉलीगैलेक्टुरोनेज और एक्सोपॉलीगैलेक्टुरोनेज। एंडोपॉलीगैलेक्टुरोनेज आंतरिक α 1-4 ग्लाइकोसिडिक लिंकेज को उत्प्रेरित करता है और एक्सोपॉलीगैलेक्टुरोनेज पेक्टेट अणुओं में बाहरी α 1-4 ग्लाइकोसिडिक लिंकेज को उत्प्रेरित करता है कवक द्वारा उत्पादित एंडो-पीजी अम्लीय पीएच और कम तापमान पर काम करता है, लेकिन खाद्य उद्योग और कपड़ा उद्योग में एंडो-पीजी के उपयोग के लिए ऐसे एंजाइम की आवश्यकता होती है जो उच्च तापमान और क्षारीय स्थितियों में भी काम करता हो। बैसिलस सबटिलस को संदर्भ स्ट्रेन के रूप में इस्तेमाल किया गया था। सेब के छिलके, मूली के छिलके और खट्टे फलों के छिलके जैसे विभिन्न सब्सट्रेट का उपयोग करके, यह निष्कर्ष निकाला गया कि खट्टे फलों के छिलके अधिकतम एंजाइम सांद्रता उत्पन्न करते हैं। आगे के लक्षण वर्णन से पता चला कि बैसिलस सबटिलस द्वारा उत्पादित ईपीजी का इष्टतम तापमान 60 डिग्री सेल्सियस और इष्टतम पीएच 5 है। जेल निस्पंदन के साथ शुद्धिकरण का अधिकतम गुना देखा गया। एंजाइम का आणविक भार 67 kd था। बैसिलस सबटिलस द्वारा उत्पादित ईपीजी के लिए Vmax 1.21 mg/ml और Km 2423 mol/min/mg था।