पैट्रिक सी बेयर, जुरगेन एम ओवरथ, अंजा अर्ब्सचैट, राल्फ़ शुबर्ट और हेल्मुट गीगर
उद्देश्य: स्टेम सेल-आधारित थेरेपी अंग विफलता और ऊतक चोट के बाद पुनर्जनन का समर्थन करने के लिए एक आशाजनक विकल्प प्रतीत होता है। MSCs के प्रत्यारोपण के लिए अधिकतम पुनर्योजी क्षमता वाली कोशिकाओं की आवश्यकता होती है। इसलिए, MSCs के पुनर्योजी कारकों की रिहाई में सुधार करने के लिए नई रणनीतियों पर शोध की तत्काल आवश्यकता है।
विधियाँ: मानव वसा-व्युत्पन्न स्ट्रोमल/स्टेम कोशिकाएँ (ASC) लिपोएस्पिरेट्स से अलग की गईं, उनकी विशेषताएँ निर्धारित की गईं और उनका संवर्धन किया गया। कोशिकाओं को या तो मानक परिस्थितियों में संवर्धित किया गया या हाइपोक्सिक वातावरण (0.5% O2) में ऊष्मायन द्वारा या पुनः संयोजक मानव ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-α (TNFα) या पुनः संयोजक मानव एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर (EGF) की उपस्थिति में 48 घंटों के लिए सामान्य अवस्था में रखा गया। सबसे पहले, qPCR विश्लेषण द्वारा सात चयनित पुनर्जनन को बढ़ावा देने वाले कारकों का मूल्यांकन किया गया। इसके बाद 507 प्रोटीनों के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रोटीन सरणी का उपयोग करके ASC के स्रावी का अनुमान लगाया गया।
परिणाम: पीसीआर विश्लेषण ने तीन पूर्व उपचारों द्वारा एएससी के जीन अभिव्यक्ति के विभेदक प्रेरण को दिखाया। जबकि हाइपोक्सिया में एएससी ने वीईजीएफ, एफजीएफ-7 और आईजीएफ-II का एक महत्वपूर्ण एमआरएनए प्रेरण दिखाया, अन्य पूर्व उपचारों ने वीईजीएफ अभिव्यक्ति में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं किया। एचबी-ईजीएफ और एम-सीएसएफ की जीन अभिव्यक्ति हाइपोक्सिया में और टीएनएफα के साथ ऊष्मायन द्वारा महत्वपूर्ण रूप से प्रेरित हुई, लेकिन ईजीएफ नहीं। एंजियोपोइटिन-जैसे 1 एमआरएनए तीनों प्रीकंडीशनिंग रेजिमेंस द्वारा महत्वपूर्ण रूप से प्रेरित नहीं हुआ। प्रोटीन सरणी द्वारा मूल्यांकन से पता चला कि जांचे गए 507 प्रोटीनों में से 21.9% हाइपोक्सिया में ऊष्मायन के बाद पांच गुना से अधिक बढ़े हुए पाए गए (507 प्रोटीनों में से 111)। ईजीएफ के साथ प्रीइंक्यूबेशन के परिणामस्वरूप 32.3% (164/507) का अपरेगुलेशन हुआ, जबकि टीएनएफα ने सभी मूल्यांकित प्रोटीनों में से 28.8% (146/507) का अपरेगुलेशन किया।
निष्कर्ष: निष्कर्ष बताते हैं कि तीनों प्रीकंडीशनिंग व्यवस्थाओं ने कई तरह के प्रोटीन प्रेरित किए। हालांकि, EGF के साथ अल्पकालिक प्रीट्रीटमेंट ने प्रोटीन की सबसे अधिक मात्रा प्रेरित की, और इसलिए, सेल थेरेप्यूटिक दृष्टिकोणों के लिए यह सबसे अच्छी प्रीकंडीशनिंग व्यवस्था प्रतीत होती है।