जर्नल ऑफ माइक्रोबियल एंड बायोकेमिकल टेक्नोलॉजी

अमूर्त

थर्मोफिलिक कवक से एक चिटिनेज़ जीन की अति अभिव्यक्ति , सैक्रोमाइसिस सेरेविसिया में थर्मोमाइसिस लैनुगिनोसस और पुनः संयोजक चिटिनेज़ का लक्षण वर्णन

एम. प्रसाद और पी. पलानीवेलु

थर्मोफिलिक फंगस, थर्मोमाइसेस लैनुगिनोसस ATCC 44008 से एक चिटिनेस जीन को क्लोन किया गया है और सैकरोमाइसेस सेरेविसिया SEY 2101 में इसे अधिक मात्रा में व्यक्त किया गया है। पुनः संयोजक चिटिनेस को घुलनशील स्रावित प्रोटीन के रूप में उत्पादित किया गया था। एंजाइम गतिविधि प्रेरण माध्यम में 30 डिग्री सेल्सियस पर चौथे दिन अधिकतम पाई गई। अधिक मात्रा में व्यक्त चिटिनेस ने pH 6.5 और 60 डिग्री सेल्सियस पर इष्टतम गतिविधि प्रदर्शित की। पुनः संयोजक चिटिनेस ने 50 डिग्री सेल्सियस पर 6 घंटे के बाद 60% से अधिक एंजाइम गतिविधि को बनाए रखते हुए उल्लेखनीय थर्मोस्टेबिलिटी का श्रेय दिया। SDS-PAGE द्वारा मापे गए अनुसार अधिक मात्रा में व्यक्त चिटिनेस का आणविक द्रव्यमान 42 kDa था। एंजाइम के KM और Vmax जैसे गतिज पैरामीटर क्रमशः 0.403 mM और 8.74 mmoles/min/mg प्रोटीन पाए गए। पुनः संयोजक चिटिनेज के संश्लेषण को ग्लूकोज द्वारा दृढ़ता से दबा दिया गया था। यूकेरियोटिक ट्रांसलेशनल अवरोधक, प्रेरण माध्यम में साइक्लोहेक्सीमाइड ने 10% उच्च गतिविधि दिखाई, जबकि 30% गतिविधि ट्रांसक्रिप्शनल अवरोधकों, अर्थात 8-एज़ागुआनिन और 8-हाइड्रॉक्सीक्विनोलिन द्वारा बाधित हुई। अत्यधिक अभिव्यक्त पुनः संयोजक चिटिनेज को चिटूलिगोसेकेराइड तैयार करने के लिए दवा उद्योग में संभावित अनुप्रयोग मिल सकता है।