मेरवत एम.ए. एल-गेंडी और अहमद एम.ए. एल-बोंडक्ली
औषधीय पौधों (सिम्पोबोगोन प्रॉक्सिमस, एनेथम ग्रेवोलेंस, आर्टेमिसिया जुडाइका और कॉर्कोरस ओलिटोरियस) के माइक्रोबियल एंडोफाइट्स पर हमारे खोज कार्यक्रम के दौरान, सिम्पोबोगोन प्रॉक्सिमस से प्राप्त एंडोफाइटिक स्ट्रेन स्ट्रेप्टोमाइसेस एसपी. ईएसआरएए- 301097 हाइपर ज़ाइलेनस उत्पादक साबित हुआ। एसएसएफ के तहत ज़ाइलेनस उत्पादन के लिए सब्सट्रेट समर्थन के रूप में विभिन्न स्थानीय रूप से उपलब्ध कृषि-औद्योगिक अवशेषों की स्क्रीनिंग ने गेहूं के चोकर (डब्ल्यूबी) का मिश्रण प्रदर्शित किया; ईएसआरएए-301097 ज़ाइलेनस उत्पादन के प्रेरण के लिए कुशल प्रेरक के रूप में 0.5:1:1 के अनुपात में मकई के कोब (सीसी) के साथ गन्ने की खोई (एससीबी) का उपयोग किया गया क्योंकि इसने 3, 4 और 4 दिनों के ऊष्मायन के बाद व्यक्तिगत डब्ल्यूबी, एससीबी या सीसी (1167, 1241 या 1404 यूजीडीएस-1) की तुलना में किण्वन के चौथे दिन उच्चतम एंजाइम उत्पादकता (2364 यूजीडीएस-1) दी। तापमान 30-40 डिग्री सेल्सियस, पीएच 7.0, 107 बीजाणु जीडीएस-1 का इनोकुलम स्तर, 80-85% प्रारंभिक नमी सामग्री और 800 माइक्रोन के सब्सट्रेट कण आकार सहित भौतिक प्रक्रिया मापदंडों को अनुकूलित करने के बाद ज़ाइलेनस उत्पादन को 3819 यूजीडीएस-1 तक बढ़ाया गया। नाइट्रोजन स्रोत के रूप में सोयाबीन और मकई के ठोस मिश्रण के साथ एंजाइम उत्पादन में कुल 23.96% की वृद्धि प्राप्त की गई, लेकिन कार्बन या धातु पूरकता के साथ कोई वृद्धि नहीं हुई। जबकि ट्वीन 20 को जोड़ने से ज़ाइलेनस की उपज 5709.2 यूजीडीएस-1 तक स्पष्ट हो गई थी, एसडीएस ने इसके उत्पादन को 750.29 यूजीडीएस-1 तक सीमित कर दिया। किण्वित ठोस मिश्रण से ज़ाइलेनस (6312.45 यूजीडीएस-1) के प्रभावी निष्कर्षण के लिए अनुकूलित निक्षालन पैरामीटर साइट्रेट बफर (0.1 एम, पीएच 4.0) पाए गए जिसमें निक्षालन एजेंट के रूप में 0.2% ट्वीन 80, निष्कर्षक मात्रा 1:8 - 1:10 (w/v), भिगोने का समय 120 मिनट, निक्षालन पीएच 4 और 150 आरपीएम पर हलचल के तहत निक्षालन तापमान 50 डिग्री सेल्सियस था। स्ट्रेप्टोमाइसेस एसपी. ईएसआरएए-301097 की 44.61 गुना शुद्धि और 32.52% ज़ाइलेनस रिकवरी का समग्र स्तर 493.48 यूएमजी-1 की विशिष्ट गतिविधि के साथ हासिल किया गया था। शुद्ध किए गए एंजाइम ने एसडीएस-पीएजीई पर एक एकल प्रोटीन बैंड दिखाया जो एंजाइम की मोनोमेरिक प्रकृति को दर्शाता है जिसका आणविक भार ~31.5 केडीए है। इसके अलावा, जबकि सिस्टीन प्रोटीज (1, 10-फेनैंथ्रोलाइन और डिथियोथ्रेटोल), मेटालोप्रोटीज (ईडीटीए और ईजीटीए) और थियोप्रोटीज (आयोडोएसिटामाइड और पी-क्लोरोमेरक्यूरिबेन्जेट) के अवरोधकों का ज़ाइलेनस गतिविधि पर कोई मामूली प्रभाव नहीं था, सेरीन प्रोटीज अवरोधक (पीएमएसएफ) ने इसे काफी कम कर दिया।