जीन प्रौद्योगिकी

अमूर्त

जन्मजात हृदय रोग वाले रोगियों में FOG2 जीन का उत्परिवर्तन विश्लेषण

बृंदा एलंगोवन

जन्मजात हृदय रोग (सीएचडी) विकासात्मक दोष के प्रकारों में से एक है, जिसमें शिशुओं में रुग्णता की उच्च दर है। एक प्रतिलेखन कारक GATA बाइंडिंग फैक्टर 4 (GATA4) को भ्रूणजनन और हृदय विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाने के लिए रिपोर्ट किया गया है। अध्ययन का उद्देश्य जन्मजात हृदय रोग में FOG2 जीन के उत्परिवर्तन विश्लेषण का मूल्यांकन करना है। हमने भारतीय आबादी से CHD रोगियों में दुर्लभ विविधताओं की पहचान के लिए FOG2 को चुना है। अध्ययन का मूल्यांकन करने के लिए हमने एक्सॉन 7 और एक्सॉन 8 के लिए पीसीआर प्रवर्धन किया है, क्योंकि FOG2 के अधिकांश जिंक फिंगर डोमेन इन दो एक्सॉन में स्थानीयकृत हैं। एक्सॉन 8 को 5 अलग-अलग क्षेत्रों में विभाजित किया गया था यानी एक्सॉन 8A-8E क्योंकि इसमें लंबा कोडिंग क्षेत्र है। इन एक्सॉन को विभिन्न स्थितियों में प्रवर्धित किया गया था। उदाहरण के लिए, एक्सॉन 8A-B और E को प्लेटिनम टैक डीएनए पॉलीमरेज़ के साथ प्रवर्धित किया गया था, बिना किसी पीसीआर एन्हांसर जैसे कि डीएमएसओ (डाय-मिथाइल-सल्फो-ऑक्साइड) या बीटाइन की आवश्यकता के। हालाँकि, एक्सॉन 8C को डीएमएसओ की उपस्थिति में प्रवर्धित किया गया था। प्रत्येक एक्सॉन के लिए एनीलिंग तापमान अलग-अलग होता है। एक्सॉन 7 प्रवर्धित टैक डीएनए पॉलीमरेज़ है। प्रवर्धित उत्पादों की विशिष्टता और मात्रा की जाँच 100bp डीएनए लैडर द्वारा की जाती है।