जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

ΒETA2/Neurod1 ट्रांसडक्शन के साथ म्यूरिन इंसुलिनोमा सेल-कंडीशन्ड मीडियम , इन विट्रो और इन विवो दोनों में एडीपोज-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं के β-जैसी कोशिकाओं में विभेदन को कुशलतापूर्वक प्रेरित करता है

कोइची कावामोटो, शिगेहरू याबे, मसामित्सु कोनो, हिदेशी इशी, नाओहिरो निशिदा, जून कोसेकी, सत्सुकी फुकुदा, योशितो तोमिमारू, नाओकी हमा, हिरोशी वाडा, शोगो कोबायाशी, हिदेतोशी एगुची, मासाहिरो तनेमुरा, तोशिनोरी इटो, इयुन यंग ली, एरी मुकाई, ताकाशी मिक्की, युइचिरो डोकी, मसाकी मोरी, तात्सुओ एस हमजाकी, हिरोकी नागानो और हितोशी ओकोची

पृष्ठभूमि: एडीपोज़ ऊतक-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्टेम सेल (ADSC) सहित मेसेनकाइमल स्टेम सेल (MSCs), बहुशक्तिशाली होते हैं और अग्नाशयी β कोशिकाओं सहित विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं में विभेदित हो सकते हैं। इसलिए, ADSCs टाइप 1 मधुमेह (T1DM) के उपचार के लिए एक संभावित कोशिका स्रोत प्रस्तुत करते हैं। हालाँकि, वर्तमान इन विट्रो प्रोटोकॉल पूरी तरह से परिपक्व इंसुलिन-उत्पादक β कोशिकाओं को प्रेरित करने के लिए अपर्याप्त हैं। इस अध्ययन में, हमने इंसुलिन-उत्पादक कोशिकाओं में ADSCs की विभेदन क्षमता में सुधार करने के लिए म्यूरिन इंसुलिनोमा सेल लाइन-व्युत्पन्न कंडीशन्ड मीडियम (MIN6-CM) के साथ बेसिक हेलिक्स-लूप-हेलिक्स ट्रांसक्रिप्शन फ़ैक्टर परिवार के सदस्य ΒETA2 (NeuroD1) के ओवरएक्सप्रेशन की प्रभावशीलता का आकलन किया।
विधि: C57BL/6 चूहों से म्यूरिन ADSCs को अलग किया गया, कई ट्रांसक्रिप्शनल फ़ैक्टर (TFs) के साथ ट्रांसड्यूस किया गया, और स्थिर ट्रांसफ़ेक्टेंट्स स्थापित किए गए। MIN6-CM तैयार किया गया। स्ट्रेप्टोज़ोटोसिन के एक ही इंजेक्शन से सिंजेनिक प्राप्तकर्ता चूहों को मधुमेह बना दिया गया , और प्राप्तकर्ता चूहों के गुर्दे के कैप्सूल के नीचे विभेदित कोशिकाओं को प्रत्यारोपित किया गया। अगले, रक्त शर्करा के स्तर की निगरानी की गई।
परिणाम: इन विट्रो में इंसुलिन mRNA अभिव्यक्ति को प्रेरित करने के लिए अकेले CM पर्याप्त था । हालांकि, अन्य TFs का पता नहीं चला। MIN6-CM के साथ संवर्धित ADSCs ने इन विट्रो में इंसुलिन की अभिव्यक्ति को प्रेरित किया, लेकिन अन्य β कोशिका-संबंधी TFs का पता लगाया गया। हालांकि, MIN6-CM में BETA2 पारगमन के परिणामस्वरूप कई β कोशिका फेनोटाइपिक मार्करों की मजबूत अभिव्यक्ति हुई। इसके अलावा, इंसुलिन सामग्री विश्लेषण से इन विट्रो में इंसुलिन प्रोटीन की अभिव्यक्ति का पता चला। इसके
अलावा, इन विवो प्रत्यारोपण अध्ययनों में CM के साथ BETA2 पारगमन के एक साथ उपयोग की प्रभावशीलता का पता चला। निष्कर्ष: