जैव रसायन एवं विश्लेषणात्मक जैव रसायन

अमूर्त

एचएल60 कोशिकाओं में टीपीए द्वारा प्रेरित मोनोसाइट/मैक्रोफेज-जैसे कोशिका विभेदन से हिस्टोन एच4 लाइसिन 16 एसिटिलीकरण की हानि होती है

राहुल कुमार वेम्पति

12-O-टेट्राडेकेनोयलफोर्बोल-13-एसीटेट (TPA) एक फोर्बोल एस्टर है और HL60 कोशिकाओं में मोनोसाइट/मैक्रोफेज जैसे सेल भेदभाव को प्रेरित करता है। विभेदित और अविभेदित HL60 कोशिकाओं के बीच जीन अभिव्यक्ति के स्तर और पैटर्न बहुत भिन्न होते हैं। एपिजेनेटिक हिस्टोन संशोधन ट्रांसक्रिप्शनल सक्रियण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं और संशोधन के स्तर में परिवर्तन जीन अभिव्यक्ति पैटर्न को बहुत प्रभावित करते हैं। हिस्टोन H4 लाइसिन 16 (H4K16ac) का एसिटिलीकरण एक ऐसा संशोधन है और ट्रांसक्रिप्शनल सक्रियण में इसकी महत्वपूर्ण भूमिका है। शारीरिक या रोग संबंधी प्रभाव के कारण इसके एसिटिलीकरण स्तर में परिवर्तन से सेलुलर जीन अभिव्यक्ति पर नाटकीय प्रभाव पड़ेगा। यहाँ, HL60 कोशिकाओं में H4K16ac स्तरों पर TPA प्रेरित भेदभाव के प्रभाव को देखने के लिए एक अध्ययन किया गया था। फ्लो साइटोमेट्रिक विश्लेषण से प्राप्त परिणामों ने TPA विभेदित HL60 कोशिकाओं पर मैक्रोफेज सेल सरफेस मार्कर CD11b की अभिव्यक्ति दिखाई और वेस्टर्न ब्लॉट्स ने विभेदित कोशिकाओं में H4K16ac के भारी डाउनरेगुलेशन का खुलासा किया। इम्यूनोब्लोटिंग और सह-इम्यूनोप्रेसीपिटेशन परख ने H4K16 एसिटिलेशन के DNA क्षति पर निर्भर वृद्धि और अविभेदित कोशिकाओं में γH2AX के साथ इसके सह-स्थानीयकरण का खुलासा किया। जबकि, TPA विभेदित कोशिकाओं (CD11B+ve) ने DNA क्षति की उपस्थिति में H4K16 एसिटिलेशन स्तरों में ऐसी कोई वृद्धि नहीं दिखाई। वर्तमान अध्ययन से पता चलता है कि TPA द्वारा प्रेरित HL60 कोशिकाओं का मैक्रोफेज में विभेदन H4K16 एसिटिलेशन के डाउनरेगुलेशन की ओर ले जाता है।