जर्नल ऑफ बैक्टीरियोलॉजी एंड पैरासिटोलॉजी

अमूर्त

लेप्टोस्पाइरा का पता लगाने और लक्षण-निर्धारण में आणविक दृष्टिकोण

अहमद अहमद, मार्टिन पी. ग्रोबुश, पॉल आर. क्लैट्सर और रूडी ए. हर्ट्सकीरल

लेप्टोस्पायरोसिस का पारंपरिक निदान और लेप्टोस्पाइरा एसपीपी का लक्षण वर्णन मुख्य रूप से सीरोलॉजी पर निर्भर करता है। निदान में सीरोलॉजी का एक बड़ा दोष यह है कि इसके लिए एंटी-लेप्टोस्पाइरा एंटीबॉडी के पर्याप्त स्तर की आवश्यकता होती है, इस प्रकार रोग के शुरुआती तीव्र चरण में पुष्टि को जोखिम में डाल देता है। क्रॉस एग्लूटिनिन अवशोषण परीक्षण (सीएएटी) जो लेप्टोस्पाइरा सीरोवर्स को निर्धारित करता है, तकनीकी रूप से मांग और श्रमसाध्य विधि है और इसलिए इसे केवल कुछ प्रयोगशालाओं में ही किया जाता है। नवीन आणविक नैदानिक ​​परीक्षण मुख्य रूप से पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) पर निर्भर करते हैं। पीसीआर पूरी तरह से सीरोलॉजिकल परीक्षण का पूरक है, क्योंकि यह लक्षणों की शुरुआत के बाद पहले 5 दिनों में विशेष रूप से संवेदनशील है। रियल टाइम पीसीआर तेज़ है और इसकी उच्च नैदानिक ​​सटीकता के लिए मान्य किया गया है। लेप्टोस्पाइरा प्रजातियों को परिभाषित करने के लिए आणविक तकनीकों की शुरूआत ने इस जीनस में उपभेदों के वर्गीकरण में क्रांति ला दी, क्योंकि प्रजातियां और सीरोग्रुप बहुत कम सहसंबंध दिखाते थे। आणविक प्रजातिकरण में संदर्भ परीक्षण डीएनए समरूपता निर्धारित करने पर आधारित है। यह तरीका थकाऊ और उपयोगकर्ता के अनुकूल नहीं है और इसलिए इसे तेजी से अन्य तकनीकों द्वारा प्रतिस्थापित किया जा रहा है। आज तक, आणविक टाइपिंग विधियों का खजाना उपलब्ध है। सबसे आकर्षक वे तकनीकें हैं जो सीधे डिजिटल और इलेक्ट्रॉनिक रूप से पोर्टेबल डेटा प्रदान करती हैं। ऐसी तकनीकों में फ्लोरोसेंट एम्पलीफाइड फ्रैगमेंट लेंथ पॉलीमॉर्फिज्म (FAFLP), एरे टाइपिंग, मल्टीलोकस वैरिएबल नंबर ऑफ टेंडम रिपीट्स एनालिसिस (MLVA) और सीक्वेंस-बेस्ड फाइलोजेनी और कुछ हद तक पल्स्ड फील्ड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस (PFGE) शामिल हैं। मल्टीलोकस सीक्वेंस टाइपिंग (MLST) लेप्टोस्पाइरा स्ट्रेन विविधता का निर्धारण करने के लिए सबसे मजबूत तरीका है और भविष्य में संभवतः पूरे जीनोम अनुक्रमों पर फाइलोजेनी द्वारा ही इसे पार किया जाएगा।