जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

कैल्वेरियल "क्रिटिकल साइज" दोष के चूहे मॉडल में दंत पल्प स्टेम कोशिकाओं के वाहक के रूप में बायोडिग्रेडेबल स्कैफोल्ड्स द्वारा प्रेरित अस्थि पुनर्जनन का हिस्टोमोर्फोमेट्रिक मूल्यांकन

सुज़ाना एनीबाली, रोबर्टा क्वारेंटा, एंटोनियो स्कारानो, एंड्रिया पिलोनी, एंड्रिया सिस्कोनेटी, मारिया पाओला क्रिस्टली, डायना बेलाविया और लिविया ओटोलेघी

उद्देश्य: इस अध्ययन का उद्देश्य विशिष्ट स्टेम कोशिकाओं का परीक्षण करना था जो विशिष्ट ढांचे के साथ मिलकर अस्थि निर्माण को बढ़ा सकें।

विधियाँ: डेंटल पल्प स्टेम सेल (DPSCs) को ग्रैनुलर डिप्रोटीनाइज्ड बोवाइन बोन (GDPB) या बीटा-ट्राईकैल्शियम फॉस्फेट (ß-TCP) के साथ कैल्वेरियल "क्रिटिकल साइज़" दोष के एक चूहे मॉडल में बोया गया। DPSCs को स्थायी मानव दांतों से अलग किया गया, वास्तविक समय-पीसीआर और इम्यूनोफ्लोरेसेंस द्वारा विशिष्ट स्टेम सेल मार्कर (नैनोग और ऑक्ट-4) का उपयोग करके प्राप्त और लक्षणित किया गया। कोशिकाओं को 10-15 दिनों के लिए 100μM L-एस्कॉर्बिक एसिड के साथ ओस्टियोब्लास्टिक फेनोटाइप की ओर विभेदित किया गया, हर दिन कल्चर माध्यम में जोड़ा गया और α-MEM माध्यम में FBS का 20 वॉल्यूम प्रतिशत जोड़ा गया। विशिष्ट मार्करों (ओस्टियोनेक्टिन और रनएक्स2) की अभिव्यक्ति को मापकर वास्तविक समय-पीसीआर के साथ ओस्टियोजेनिक प्रतिबद्धता का मूल्यांकन किया गया। जब पर्याप्त संख्या में कोशिकाएँ प्राप्त हो गईं, तो DPSC को ट्रिप्सिनाइज़ किया गया, कल्चर माध्यम में धोया गया और GDPB तथा β-TCP स्कैफोल्ड पर 0.5-1×106 कोशिकाओं/स्कैफोल्ड के घनत्व पर बोया गया। 8 एथिमिक टी-कोशिका की कमी वाले नग्न चूहों की पार्श्विका हड्डी से दो द्विपक्षीय महत्वपूर्ण आकार के गोलाकार दोष (5 मिमी व्यास; 1 मिमी मोटाई) बनाए गए। प्रत्येक चूहे के लिए एक कपाल दोष को केवल स्कैफोल्ड से भरा गया और दूसरे दोष को स्टेम कोशिकाओं से भरे स्कैफोल्ड से भरा गया। सर्जरी के 12 सप्ताह बाद जानवरों को मार दिया गया और हिस्टोमोर्फोमेट्रिक विश्लेषण किया गया। समूहों के बीच अंतर का विश्लेषण एकतरफा विचरण विश्लेषण (ANOVA) द्वारा किया गया, उसके बाद फिशर के संरक्षित कम से कम महत्वपूर्ण अंतर (PLSD) पोस्ट-हॉक परीक्षण द्वारा किया गया। p-value <0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना गया।

परिणाम: जीडीपीबी समूह में जीडीपीबी/डीपीएससी की तुलना में लैमेलर हड्डी का प्रतिशत अधिक था, अकेले बीटा-टीसीपी में बीटा-टीसीपी/डीपीएससी की तुलना में कम स्तर था। स्टेम सेल के जुड़ने से स्कैफोल्ड -आधारित दोनों इम्प्लांट में बुनी हुई हड्डी के निर्माण में उल्लेखनीय वृद्धि हुई, हालांकि जीडीपीबी आधारित इम्प्लांट में यह अभी भी अधिक है

निष्कर्ष: हमारे निष्कर्षों से संकेत मिलता है कि हड्डियों के उत्थान को प्रेरित करने के लिए ढांचे के रूप में उपयोग किए जाने वाले जीडीपीबी और बीटा-टीसीपी को ऊतक-इंजीनियर्ड निर्माणों में डीपीएससी को जोड़ने से लाभ हो सकता है।