जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

मानव केराटिनोसाइट्स के लिए कल्चर माध्यम का मूल्यांकन

फैबियाना रेजिना ज़ेवियर बतिस्ता, जुसारा रेहडर और मारिया बीट्रिज़ पुज़ी

मानव केराटिनोसाइट्स त्वचा की ऊतक इंजीनियरिंग के लिए आवश्यक हैं, जिसका उपयोग नैदानिक ​​अनुप्रयोग के उद्देश्य से ऊतक मरम्मत और पुनर्जनन में किया जाता है। कोशिका प्रसार करते समय कम समय में उच्च कोशिका सांद्रता की आवश्यकता महत्वपूर्ण है। इन कोशिकाओं की वृद्धि और रखरखाव में आमतौर पर MCDB 153 माध्यम का उपयोग शामिल होता है, जिसे जानवरों से प्राप्त घटकों, जैसे कि वृद्धि कारक और भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) के साथ पूरक किया जाता है। इस कार्य का उद्देश्य केराटिनोसाइट प्रसार के लिए MCDB 153 माध्यम पर आधारित विभिन्न योगों का मूल्यांकन करना था। इसके लिए, 24 फैक्टरियल डिज़ाइन का उपयोग करके त्वचा कोशिका संवर्धन के लिए कौन से पूरक महत्वपूर्ण हैं, यह परिभाषित करने के लिए कई प्रयोग किए गए। त्वचा के नमूने डर्मोलिपेक्टोमी, प्लास्टिक सर्जरी ऑपरेशन के लिए प्रस्तुत किए गए चार सहमति देने वाले रोगियों से प्राप्त किए गए थे। इन टुकड़ों को 37ºC पर चार घंटे के लिए 0.25% ट्रिप्सिन-EDTA के साथ उपचारित किया गया। इसके अलावा, एपिडर्मिस को डर्मिस से अलग किया गया, जिससे त्वचा कोशिकाएँ प्राप्त हुईं। बैच कल्चर 6 और 96-वेल प्लेट्स में किए गए, इसके अलावा 25 cm2 फ्लास्क भी थे। सेल ग्रोथ और मेटाबोलिज्म से संबंधित परिणामों से पता चला कि केराटिनोसाइट्स MCDB 153 मीडियम में पूरी तरह से विकसित हुए थे जिसमें इंसुलिन (7.5 µg.mL-1), बोवाइन पिट्यूटरी एक्सट्रैक्ट-BPE (80 µg.mL-1), एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर-EGF (0.08 µg.mL-1), हाइड्रोकार्टिसोन (0.63 µg.mL-1) और ग्लूटामाइन (1 gL-1) शामिल थे। दूसरी ओर, प्रायोगिक डिजाइन में प्रस्तावित कल्चर मीडिया से संतोषजनक सेल ग्रोथ नहीं हुई। इसके अलावा, हालांकि, अधिकांश मामलों में शुरुआती ग्लूकोज सांद्रता कम थी, 1 gL-1 तक पहुंचने वाली कोशिकाओं द्वारा लैक्टेट का दृढ़ता से उत्पादन किया गया था।