वंशानुगत आनुवंशिकी: वर्तमान शोध

अमूर्त

सीएनजीबी3 नॉकआउट चूहों में कम वेक्टर वॉल्यूम के साथ एएवी-मध्यस्थ जीन थेरेपी का मूल्यांकन, एक्रोमैटोप्सिया का एक मॉडल

लियू एक्स, झांग वाई, डु डब्ल्यू, शि डब्ल्यू, ताओ वाई, डेंग डब्ल्यू, ली जे, झाओ सी, पैंग जे

उद्देश्य: यह अध्ययन यह जांचने के लिए डिज़ाइन किया गया था कि क्या सबरेटिनल इंजेक्शन के लिए उपयोग किए जाने वाले वेक्टर की मात्रा को C57bl/6J माउस के पूरे रेटिना को ट्रांसफ़ेक्ट करने के लिए कम किया जा सकता है और क्या यह Cngb3 नॉकआउट (KO) माउस मॉडल में शंकु के कार्य को बहाल कर सकता है।
तरीके: C57bl/6J चूहों और Cngb3 KO चूहों को क्रमशः AAV5-smCBAmCherry वेक्टर और AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3 वेक्टर का 0.5 μL या 1 μL का सबरेटिनल इंजेक्शन मिला। ट्रांसफ़ेक्ट क्षेत्र का मूल्यांकन करने के लिए वाइल्ड-टाइप माउस की आंखों से रेटिना के पूरे माउंट और फ़्रोजन सेक्शन तैयार किए गए। Cngb3 KO चूहों की आंखों में वेक्टर इंजेक्शन के दो महीने बाद डार्क और लाइट-एडेप्टेड इलेक्ट्रोरेटिनोग्राम (ERG) रिकॉर्ड
किए गए। mCherry पॉजिटिव रेटिनल पिगमेंट एपिथेलियल (RPE) और फोटोरिसेप्टर कोशिकाएँ पूरे रेटिना में देखी गईं। AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3-इंजेक्टेड Cngb3 KO चूहों में, 1-μL-इंजेक्टेड चूहों ने 0.5-μL-इंजेक्टेड चूहों की तुलना में फोटोपिक ERG बहाली का एक उच्च औसत दिखाया। हालाँकि, 1-μL-इंजेक्टेड चूहों में स्कोटोपिक ERGs कम थे, जो दर्शाता है कि उच्च इंजेक्शन मात्रा के परिणामस्वरूप अधिक क्षति हुई।
निष्कर्ष: वेक्टर की कम मात्रा (0.5 μL) ने कम क्षति को प्रेरित किया। हालाँकि, वेक्टर की उच्च खुराक (1 μL) Cngb3 KO माउस में उच्च ERG फ़ंक्शन को पुनर्स्थापित करती है।