जीन प्रौद्योगिकी

अमूर्त

स्वतःस्फूर्त डीएनए क्षति के लिए जिम्मेदार अंतर्जात कारक जो मानव कोशिकाओं में यादृच्छिक एकीकरण की ओर ले जाते हैं

हारुना कामेकावा, आया कुरोसावा, मासूमी उमेहारा, एरिको टोयोडा और नोरिटाका अडाची

यादृच्छिक एकीकरण एक ऐसी घटना है जिसमें संक्रमित डीएनए अणु गैर-समरूप पुनर्संयोजन के माध्यम से मेजबान जीनोम में (यादृच्छिक साइटों में) एकीकृत होते हैं। हालाँकि यह माना जाता है कि डीएनए डबल-स्ट्रैंड ब्रेक की मरम्मत यादृच्छिक एकीकरण घटनाओं की ओर ले जाती है, लेकिन जीवित कोशिकाओं में ये अंतर्जात डीएनए घाव कैसे उत्पन्न होते हैं, यह अच्छी तरह से समझा नहीं गया है। इस अध्ययन में, हम सबूत पेश करते हैं कि डीएनए टोपोइज़ोमेरेज़ IIa (Top2α) और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियाँ (ROS) जीनोमिक डीएनए क्षति के लिए जिम्मेदार हैं जो यादृच्छिक एकीकरण की ओर ले जाती हैं। विशेष रूप से, हमने सेल संस्कृति के दौरान सेलुलर Top2 अभिव्यक्ति स्तरों और ऑक्सीजन सांद्रता के प्रभावों की जांच करने के लिए एक मानव प्री-बी लिम्फोसाइट सेल लाइन का उपयोग किया। हम पाते हैं कि Top2α siRNA के साथ कोशिकाओं का उपचार करने से यादृच्छिक एकीकरण आवृत्ति काफी कम हो जाती है, जबकि Top2β की अनुपस्थिति का बहुत कम या कोई प्रभाव नहीं पड़ता है। हम यह भी दिखाते हैं कि इलेक्ट्रोपोरेशन के बाद कम (3%) ऑक्सीजन संस्कृति स्थितियों के तहत लगातार संवर्धित कोशिकाएँ सामान्य (21%) ऑक्सीजन स्थितियों की तुलना में यादृच्छिक एकीकरण आवृत्ति कम करती हैं। ये निष्कर्ष इस धारणा का समर्थन करते हैं कि Top2α प्रोटीन और ROS अंतर्जात कारक हैं जो डीएनए क्षति उत्पन्न कर सकते हैं, जिससे मानव कोशिकाओं में ट्रांसफ़ेक्टेड डीएनए का यादृच्छिक एकीकरण हो सकता है।