लुल्जेटा हेटेमी
परिचय:
इस अध्ययन का उद्देश्य था: ग्लाइकेटेड हीमोग्लोबिन (HbA1c) व्युत्पन्नों के परीक्षण के माध्यम से टाइप II मधुमेह के रोगियों का अनुसरण करना, लेकिन HbA1c परीक्षण के दौरान HPLC विधि का महत्व: निदान, निगरानी, अनुवर्ती कार्रवाई, मधुमेह टाइप II चिकित्सा तक पहुँच से भी परिणाम प्राप्त हुए: मधुमेह, पूर्व मधुमेह, रोगी इंसुलिन सम्मिलन, मोनोथेरेपी, लेकिन मधुमेह के रोगियों में असामान्य HgB रूपों, जैसे हीमोग्लोबिनोपैथी के निष्कर्ष भी मिले, और शोध के दौरान हमने पाया कि HPLC के साथ HbA1c परीक्षण के माध्यम से निदान अभिविन्यास कुछ विकृतियों में है, जो अन्य विकृतियों में निवारक और निदान दोनों था। यह शोध ऑलिव मेडिकल एंड लेबोरेटरी डायग्नोस्टिक सेंटर में 1 वर्ष से अधिक समय तक चला।
तरीका:
HPLC (उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी) G8 Tosoh, एक विशेष वितरक: Keis समूह दवा कोसोवो। हमारे देश में पहली बार हमने HPLC के साथ HbA1c का प्रदर्शन किया। G8 विश्लेषक Tosoh की अग्रणी HPLC परीक्षण प्रणालियों की अगली पीढ़ी है जो तेज़ और सटीक HbA1c परिणामों के लिए है। विश्लेषक पूरे रक्त नमूने को हेमोलिसिस और वाश सॉल्यूशन के साथ पतला करता है और फिर उपचारित नमूने की एक छोटी मात्रा को TSKgel ग्लाइको HSi वैरिएंट कॉलम पर इंजेक्ट करता है। कॉलम रेजिन सतह पर धनायन विनिमय समूह और एक चरण ग्रेडिएंट निक्षालन में हीमोग्लोबिन घटकों के बीच आयनिक अंतःक्रियाओं में अंतर का उपयोग करके पृथक्करण प्राप्त किया जाता है। हीमोग्लोबिन अंश (जिन्हें A1a, A1b, F, LA1c, SA1c, A0, और H-V0, H-V1, H-V2 के रूप में नामित किया गया है) को बाद में विशिष्ट नमक और pH सांद्रता वाले इल्यूशन बफ़र्स HSi वैरिएंट 1, 2, और 3 का उपयोग करके चरण-वार इल्यूशन करके कॉलम सामग्री से हटा दिया जाता है। अलग किए गए हीमोग्लोबिन घटक LED फ़ोटोमीटर फ़्लो सेल से गुज़रते हैं जहाँ अवशोषण में परिवर्तन 415nm पर मापा जाता है। G8 सॉफ़्टवेयर कच्चे डेटा को एकीकृत और कम करता है, और फिर प्रत्येक हीमोग्लोबिन अंश के सापेक्ष प्रतिशत की गणना करता है। प्रिंट-आउट में संख्यात्मक परिणाम और क्रोमैटोग्राम शामिल हैं। यह प्रत्येक चरम अंश के लिए अवशोषण बनाम अवधारण समय में परिवर्तन का प्रतिनिधित्व करता है। विश्लेषण के लिए केवल 1.6 मिनट की आवश्यकता होती है। अध्ययन 150 रोगियों पर किया गया था, जिनमें से 80% मधुमेह प्रकार II थे, उम्र 40-65 वर्ष, एचबीए1सी 6.9-11%, एचबीए 6-8, एचबीएफ 1% -8% से अधिक (48% मामलों में एचबीएफ पॉजिटिव था), नियंत्रण समूह गैर-मधुमेह, संदिग्ध, डिस्लिपिडेमिया, प्रकार II मधुमेह के कोई लक्षण नहीं वाले रोगी थे, परीक्षण का कारण यह था कि उनमें उच्च इंसुलिन प्रतिरोध था, या मध्यम, इनमें से कुछ रोगी पॉलीसिस्टिक अंडाशय सिंड्रोम के साथ थे। एचबीए1सी के परीक्षण में एचपीएलसी विधि की पूर्ण सटीकता के अलावा, इस अध्ययन में हमने टाइप II मधुमेह वाले रोगियों में एचबीएफ पॉजिटिव पाया, जो हमें एनीमिया की ओर ले जा रहा है, और इस एनीमिया का कारण गुर्दे के कार्य में कमी माना जाता है, जैसे कि मधुमेह अपवृक्कता - टाइप II मधुमेह की जटिलता, लेकिन असामान्य एचबीएफ जन्मजात और टाइप II मधुमेह के बीच अभी भी अस्पष्ट तंत्र को शामिल नहीं किया जाएगा क्योंकि हम सभी रोगियों का एचबी इलेक्ट्रोफोरेसिस के लिए परीक्षण करने में सक्षम नहीं थे। इन प्रयोगशाला निष्कर्षों से, एचबीएफ के परिणामस्वरूप विकृति बढ़ जाती है: एक जन्मजात जन्मजात रूप होने के अलावा, इसका ऊंचा स्तर घातक एनीमिया, हेमोलिटिक एनीमिया, थैलेसीमिया, थायरोटॉक्सिकोसिस, डीप वेनस थ्रोम्बोसिस, आदि के मामलों में भी पाया गया। ग्लाइकेटेड एचबी के अस्थिर रूप के रूप में LA1c, कार्बामाइलेटेड एचबी (यूरिया, गुर्दे की बीमारियों वाले रोगी) और एसिटिलेटेड एचबी (शराब का दुरुपयोग, यकृत रोग, आदि) की उपस्थिति के मामले में बढ़ सकता है, निश्चित रूप से रक्त शर्करा ग्लूकोज में वृद्धि हो सकती है।
जब रक्त शर्करा का स्तर अधिक होता है, तो आरबीसी से जुड़े ग्लूकोज अणु, जितना अधिक समय तक हाइपरग्लाइसेमिया होता है, उतना ही अधिक ग्लूकोज एचबी से जुड़ता है, और ग्लाइकेटेड एचबी अधिक होता है। इसलिए इस अध्ययन से हमें LA1c पॉजिटिव वाले लगभग 35% मामले मिले, जहाँ डायबिटिक नेफ्रोपैथी पहले ही शुरू हो चुकी थी, जिसकी पुष्टि पॉजिटिव माइक्रोएल्ब्यूमिन्यूरिया और नेफ्रोलॉजिस्ट डॉक्टर की रिपोर्ट से हुई। हमारे देश में एचबीएफ मूल्यों के असामान्य रूप, और इन 150 मामलों में एचबी के कोई अन्य असामान्य रूप नहीं थे, इसलिए दूसरी ओर हमने एचबीएफ पॉजिटिव के बीच एक सहसंबंध पाया जिसमें आसानी से या मध्यम रूप से सीरम होमोसिस्टीन या हाइपरहोमोसिस्टीनीमिया में वृद्धि हुई थी और उनमें से 10% एमटीएचएफआर उत्परिवर्ती पॉजिटिव थे (इनमें से लगभग 15% रोगियों को परीक्षण करने का अवसर मिला था, उनके प्रयोगशाला निष्कर्ष थे सीरम होमोसिस्टीन मूल्य 15-17 से थे, वयस्कों के लिए संदर्भ सीमा 5-15 μmol/L, मानव सीरम (सीमेंस) में एल-होमोसिस्टीन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए इम्यूनोसे-इम्यूलाइट- 2000 विश्लेषक विधि, और इन मामलों के अन्य एनामेनेस्टिक डेटा आंशिक रूप से नैदानिक संकेतों जैसे पैर की सूजन और पैर में दर्द के साथ थे, इसलिए जैसा कि हम जानते हैं हाइपरहोमोसिस्टीन हाइपरकोलेस्ट्रोलेमिया, होमोसिस्टिनुरिया द्वारा आनुवंशिक दोष भी कहा जाता है।
परिणाम:
कुल होमोसिस्टीन (टीएचसीवाई) हृदय रोग के आकलन में एक महत्वपूर्ण जोखिम कारक के रूप में उभरा है। टीएचसीवाई एक थियाओल युक्त अमीनो एसिड है जो मेथियोनीन के इंट्रासेल्युलर डीमेथिलेशन द्वारा निर्मित होता है, एचसीवाई इस प्रकार एक पूल के रूप में कार्य करता है जिसे बाद में बी 6 निर्भर ट्रांससल्फ्यूरेशन मार्ग का उपयोग करके फोलेट निर्भर एंजाइम मेथियोनीन सिंथेस या सिस्टीन की क्रिया के माध्यम से मेथियोनीन के पुन: निर्माण में उपयोग के लिए निकाला जा सकता है, फोलेट और बी 6 आश्रित एनीमिया का एक और कारण है मधुमेह प्रकार द्वितीय के साथ संबंध, क्योंकि यह सकारात्मक एचबीएफ फॉर्म मौजूद है जिसने हमें अधिक से अधिक परीक्षणों के लिए कहा, इसलिए इनसे हमें संवहनी सर्जन के परामर्श का पालन करना पड़ा,
निष्कर्ष:
हमने इस तथ्य के साथ निष्कर्ष निकाला कि HPLC को स्वतंत्र रूप से स्वर्ण मानक निदान पद्धति कहा जा सकता है, क्योंकि यह सर्वोत्तम पद्धति साबित हुई है। प्री-डायबिटिक के लिए जोखिम, हमारे 20% रोगियों में था, जिनमें HbA1c मान 6-6.4% के बीच था, हमारे लगभग 10% रोगियों में HbA1c मान 6.5% से अधिक थे, पहली बार जांच की गई, जो मधुमेह के लिए जिम्मेदार थे, लगभग 25% पर्याप्त नियंत्रण के साथ थे: 6.6-7% मान के साथ, और ADA (अमेरिकी मधुमेह संघ मानदंड) के अनुसार अपर्याप्त नियंत्रण के साथ HbA1c के 7-8% मान के साथ, उनमें से लगभग 45%। HBF निष्कर्षों और HbA1c निष्कर्षों से तंत्र में, HPLC के साथ एक ही मधुमेह रोगी को निम्न के लिए प्रारंभिक निदान प्राप्त हो सकता है: मधुमेह की जटिलताएँ जैसे कि गुर्दे की क्षति, यकृत की क्षति, एनीमिया, प्रारंभिक धमनीकाठिन्य, थ्रोम्बोम्बोलिज़्म, ICV के लिए जोखिम आदि।