आरके रूही और एस उमेशा
क्रूसिफ़र्स, विशेष रूप से ब्रैसिका ओलेरेशिया वर्स. कैपिटाटा (गोभी) की सबसे गंभीर बीमारी, ब्लैक रॉट, भारी उपज हानि का कारण बनती है। ब्लैक रॉट एक बीज जनित रोग है और रोगाणु के लिए बीजों का मूल्यांकन बहुत महत्वपूर्ण है। गोभी के बीजों का जैव रासायनिक और पीसीआर विश्लेषण द्वारा एक्स. कैम्पेस्ट्रिस पीवी. कैम्पेस्ट्रिस संक्रमण के लिए परीक्षण किया गया। बीज के नमूनों को तीन प्राइमरों के साथ पीसीआर विश्लेषण के अधीन किया गया, जिनमें से एचआरपीएफ जीन के लिए विशिष्ट प्राइमरों के जोड़े में से एक ब्लैक रॉट रोगाणु का पता लगा सकता था। वर्तमान अध्ययन अपनी तरह का पहला है जिसमें स्थानीय रूप से उपलब्ध गोभी की किस्मों का आणविक परख का उपयोग करके मूल्यांकन किया गया और अध्ययन क्षेत्र में व्यापक रूप से उगाई जाने वाली किस्मों की प्रयोगशाला और क्षेत्र के प्रदर्शन के बीच सहसंबंध के लिए जाँच की गई। अध्ययन का उद्देश्य गोभी के बीजों में एक्स. कैम्पेस्ट्रिस पीवी. कैम्पेस्ट्रिस की नियमित पहचान के लिए उपलब्ध विशिष्ट और संवेदनशील पीसीआर-आधारित प्रक्रियाओं का उपयोग करना था। संक्रमित बीज और पत्ती सामग्री में रोगजनक और ब्रैसिका प्रजाति, आंतरिक प्रतिलेखित स्पेसर (आईटीएस) का एक साथ पता लगाने के लिए मल्टीप्लेक्स पीसीआर को मानकीकृत किया गया था। मल्टीप्लेक्स पीसीआर फिंगरप्रिंट प्राप्त किए गए थे जो एक्स. कैम्पेस्ट्रिस पीवी. कैम्पेस्ट्रिस से एचआरपीएफ जीन के 619 बीपी खंड और ब्रैसिका एसपी से आंतरिक प्रतिलेखित स्पेसर क्षेत्र के 360 बीपी अनुभाग को बढ़ाते थे। परख ने रोगग्रस्त पौधों में और चुनिंदा मीडिया पर अलग किए गए बैक्टीरिया कॉलोनियों से एक्स. कैम्पेस्ट्रिस पीवी. कैम्पेस्ट्रिस संक्रमण का भी आसानी से पता लगाया, और पारंपरिक प्लेटिंग विधियों की तुलना में अधिक संवेदनशील और विशिष्ट था। इस प्रकार मल्टीप्लेक्स पीसीआर के उपयोग से, गोभी के बीजों में बैक्टीरिया का पता लगाने के लिए सीमा स्तर का निर्धारण संभव था।