जर्नल ऑफ़ प्लांट पैथोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी

अमूर्त

रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल प्रवर्धन द्वारा आलू लीफरोल वायरस के कोट प्रोटीन जीन का पता लगाना

मोहम्मद अमीन अलमासी, होसैन जाफ़री, अबूबकर मोरादी, नेदा ज़ंद, मेहदी अघापुर ओजाघकांडी और सईदे अघाई

लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल प्रवर्धन परख उच्च विशिष्टता और संवेदनशीलता के साथ डीएनए/आरएनए को प्रवर्धित करता है। इस अध्ययन में, हम आलू लीफरोल वायरस का पता लगाने के लिए एक अनुकूलित रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन-एलएएमपी परख का वर्णन करते हैं। सबसे पहले, 40 संदिग्ध नमूनों वाले संग्रह में वायरस का पता लगाने के लिए डीएएस-एलिसा परख की गई। अंत में, दो नमूनों को सकारात्मक नमूनों के रूप में पहचाना गया। फिर, सकारात्मक नमूनों को RT-PCR और RT-LAMP विधियों द्वारा सत्यापित किया गया। इसके अलावा, परिणामों ने प्रदर्शित किया कि RT-LAMP परख RT-PCR की तुलना में 40 गुना संवेदनशील और 4 गुना तेज़ थी। RT-LAMP परख को किसी भी थर्मल साइक्लर मशीन या परिष्कृत प्रयोगशालाओं की सुविधा से मुक्त जल स्नान में पूरा किया गया था। इसके अलावा, RT-LAMP प्रतिक्रिया में सकारात्मक नमूनों का पता मैग्नीशियम पायरोफॉस्फेट द्वारा उत्पादित मैलापन के माध्यम से लगाया गया था। दिलचस्प बात यह है कि
प्रतिक्रिया में कैल्शियम पायरोफॉस्फेट बनाने वाले MgSO4 के बजाय CaCl2 का अनुप्रयोग मैलापन की स्थिरता और सांद्रता दोनों को काफी बढ़ा सकता है। नतीजतन, यह MgSO4 का एक दिलचस्प विकल्प हो सकता है। कुल मिलाकर, नव विकसित आरटी-एलएएमपी परख आलू लीफरोल वायरस और अन्य वायरल पादप रोगजनकों का शीघ्र पता लगाने के लिए एक संवेदनशील, विशिष्ट और कम लागत वाली विधि हो सकती है।