जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

सीरम मुक्त मीडिया में प्रत्यक्ष फीडर संपर्क के बिना सुअर प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं की संस्कृति

यांग जेवाई, लियू वाई, यू पी, लू वाई, हचिसन जेएम, लाउ वीडब्ल्यू, ली एक्स, डोव सीआर, स्टाइस एसएल और वेस्ट एफडी

पृष्ठभूमि: सुअर की दैहिक कोशिकाओं को प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं (iPSCs) में पुनः प्रोग्रामिंग करने से बुनियादी जीव विज्ञान, रोग मॉडल विकास और ज़ेनोट्रांसप्लांटेशन में आशाजनक अनुप्रयोग हैं। माउस में, भ्रूण स्टेम सेल (ESC) तकनीक ने जीन लक्ष्यीकरण, जटिल स्क्रीनिंग रणनीतियों और जानवरों के निर्माण को सक्षम करने वाले क्षेत्र में क्रांति ला दी है जो रुचि की अनूठी विशेषताओं को दिखाते हैं। सुअर में प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल तकनीक का उपयोग करने वाली हाल की सफलताओं ने सुअर प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं का उत्पादन करना संभव बना दिया है जो जर्मलाइन चिमेरिक सक्षम माउस ESCs से मिलते जुलते हैं। हालाँकि, piPSC विस्तार के लिए एक इष्टतम संस्कृति प्रणाली अभी तक विकसित नहीं हुई है। अधिकांश रिपोर्टों ने अपरिभाषित प्रणालियों में piPSCs को बनाए रखा है जो ज़ेनोप्रोडक्ट्स और फीडर परतों का उपयोग करते हैं, जो संदूषण के संभावित स्रोत हैं। तरीके: इस अध्ययन में, छह पुनर्प्रोग्रामिंग जीनों को ओवरएक्सप्रेस करके सुअर फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं से सुअर iPSCs (piPSC) की नई लाइनें बनाई गईं: POU5F1, SOX2, NANOG, LIN28, KLF4 और C-MYC। इन नई लाइनों को स्थापित माउस 2i+LIF सिस्टम, मानव mTeSR1 सिस्टम और फीडर कंडीशन्ड मीडिया सिस्टम की विविधताओं में मैट्रिजेल सब्सट्रेट पर बनाए रखने की उनकी क्षमता के लिए परीक्षण किया गया था। piPSCs का विश्लेषण और पहचान इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री, फ्लो साइटोमेट्री और भ्रूण शरीर गठन और भेदभाव की जांच करके की गई थी। परिणाम: नव निर्मित piPSCs ने iPSCs के अनुरूप रूपात्मक विशेषताएं, इम्यूनोरिएक्टिविटी और अंतर्जात प्लुरिपोटेंसी नेटवर्क के पुनर्सक्रियन को दिखाया। फीडर पर संवर्धित कोशिकाओं के समान, सभी 7 फीडर-मुक्त स्थितियों के तहत बनाए गए piPSCs ने POU5F1 और NANOG, SSEA-1, SSEA-4 और TRA1-81 व्यक्त किए। निष्कर्ष: ये निष्कर्ष दर्शाते हैं कि piPSCs को सीरम और प्रत्यक्ष फीडर संपर्क के बिना परिभाषित प्रणालियों में बनाए रखा जा सकता है, जिससे कृषि और जैव चिकित्सा दोनों क्षेत्रों में उनके संभावित उपयोग में वृद्धि हो सकती है।