जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

संघटक GFP-UTF1 अभिव्यक्ति ES और EC कोशिका विभेदन में हस्तक्षेप करती है

राजकुमार पी. थुम्मर, लोएस जे. ड्रेंथ-डाइफुइस और बार्ट जेएल एगेन

भ्रूण स्टेम कोशिकाओं में स्वयं को नवीनीकृत करने की क्षमता होती है और वे तीनों भ्रूण जनन वंशों की सभी प्रकार की कोशिकाओं में विभेदित हो सकती हैं। अविभेदित भ्रूण कोशिका प्रतिलेखन कारक 1 (UTF1) जीन ES कोशिकाओं में अत्यधिक व्यक्त होता है और हमने पहले बताया था कि UTF1 क्रोमेटिन के साथ घनिष्ठ रूप से जुड़ा हुआ है और प्लुरिपोटेंट माउस भ्रूण स्टेम (ES) और भ्रूण कार्सिनोमा (EC) कोशिकाओं के विभेदन के लिए आवश्यक है। इस अध्ययन में, हमने विभेदन में इसकी भूमिका की आगे जांच करने के लिए GFP-UTF1 को संवैधानिक रूप से व्यक्त करने वाली ES और EC कोशिका रेखाएँ तैयार कीं। GFP-UTF1 को संवैधानिक रूप से व्यक्त करने वाली ES और EC कोशिकाएँ अपने प्रसार में दब गई थीं और अभी भी स्व-नवीकरण के लिए LIF पर निर्भर थीं। GFP-UTF1 को अत्यधिक व्यक्त करने वाली ES कोशिकाओं के भ्रूण शरीर (EB) विभेदन ने सामान्य विभेदन के साथ-साथ कोशिकाओं के एक उपसमूह का विलंबित या अपूर्ण विभेदन भी दिखाया। GFP-UTF1 लगातार अविभेदित कोशिकाओं में व्यक्त किया गया था जबकि GFP-UTF1 अभिव्यक्ति विभेदित कोशिकाओं में नहीं पाई गई थी। जहाँ GFP-UTF1 व्यक्त करने वाली ES कोशिकाएँ DMSO की प्रतिक्रिया में सामान्य रूप से विभेदित हुईं, वहीं EC कोशिका विभेदन पूरी तरह से अवरुद्ध हो गया। जब GFP-UTF1 व्यक्त करने वाली ES और EC कोशिकाओं को RA से उपचारित किया गया, तो विभेदन चिह्नक प्रेरित हुए और अंतर्जात UTF1 और GFP-UTF1 प्रोटीन के स्तर में कमी आई। हालाँकि, GFP-UTF1 और UTF1 (ES कोशिकाओं में) mRNA का अभी भी पता लगाया गया था, जो दर्शाता है कि (GFP-)UTF1 प्रोटीन का क्षरण (GFP-)UTF1 mRNA के डाउन रेगुलेशन से पहले हुआ था, जो यह दर्शाता है कि RA ने UTF1 क्षरण को प्रेरित किया। इन आँकड़ों का सारांश यह दर्शाता है कि UTF1 की कमी के समान, GFP-UTF1 की अधिक अभिव्यक्ति ने ES और EC कोशिकाओं के विभेदन में बाधा उत्पन्न की।