वंशानुगत आनुवंशिकी: वर्तमान शोध

अमूर्त

तीन अलग-अलग फ्लोरोसेंट विधियों द्वारा CD34+ और CD45+ कोशिकाओं की गणना की तुलना

त्जोंका गोडजेवर्गोवा

सार
परिधीय रक्त और एफेरेसिस नमूनों में स्टेम कोशिकाओं और ल्यूकोसाइट्स की संख्या का निर्धारणउनकी कोशिका सतह पर CD34+ और CD45+ प्रोटीन के बायोमार्कर अभिव्यक्ति का उपयोग करके किया गया था। इस अध्ययन का उद्देश्य दो अलग-अलग फ्लोरोसेंट संयुग्मों का उपयोग करके एफेरेसिस नमूनों में जीवित स्टेम कोशिकाओं और ल्यूकोसाइट्स की एक साथ गिनती करना था। एंटी-CD34 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और फ्लोरोसेंट डाई DR110 के बीच के संयुग्म ने स्टेम कोशिकाओं को हरे रंग में रंगा। एंटी-CD45 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और फ्लोरोसेंट डाई ATTO620 के बीच के संयुग्म ने ल्यूकोसाइट्स को लाल रंग में रंगा। संयुग्म एंटी-CD34 एंटीबॉडी - DR110 और एंटी-CD45 एंटीबॉडी - ATTO620 को कार्बोडाइमाइड विधि द्वारा तैयार किया गया और जेल निस्पंदन द्वारा शुद्ध किया गया। गिनती एक नए स्वचालित फ्लोरोसेंस माइक्रोस्कोप EasyCounter BC का उपयोग करके की गई थी। मृत कोशिकाओं की गणना मोनोमेथीन साइनाइन डाई - सोफिया ग्रीन द्वारा की गई। छह अपहेरेसिस नमूनों का विश्लेषण किया गया। ईज़ीकाउंटर बीसी द्वारा प्राप्त परिणामों की तुलना अन्य दो मानक विधियों - फ्लो साइटोमेट्री (गुआवा ईज़ीसाइट 8HT) और फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपिक विधि (ओलंपस BX51) द्वारा प्राप्त परिणामों से की गई। ईज़ीकाउंटर बीसी और फ्लो साइटोमीटर से प्राप्त कोशिका गणना बहुत समान थी। ईज़ीकाउंटर बीसी (3-6%) के साथ प्राप्त परिणामों के भिन्नता के गुणांक फ्लो साइटोमीटर (5-8%) और ओलिंपस माइक्रोस्कोप (14-18%) के साथ कम थे।