जर्नल ऑफ़ प्लांट पैथोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी

अमूर्त

आलू वायरस Y का तेजी से पता लगाने के लिए कलरीमेट्रिक इम्यूनोकैप्चर रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल एम्प्लीफिकेशन परख

मोहम्मद अमीन अलमासी और सैयदमोहम्मद होसेनी देहाबादी

लूप-मेडिएटेड आइसोथर्मल एम्प्लीफिकेशन (LAMP) परख उच्च विशिष्टता, संवेदनशीलता, तीव्रता और दक्षता के साथ निरंतर तापमान के तहत डीएनए को बढ़ाने के लिए एक नई तकनीक है। रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पीसीआर (RT-PCR), रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन लूप-मेडिएटेड आइसोथर्मल एम्प्लीफिकेशन (RT-LAMP) और DAS-ELISA सहित कुछ डायग्नोस्टिक परख के लिए आवश्यक समय को न्यूनतम स्तर तक कम करने के लिए, आलू वायरस Y (PVY) जीनोम के आधार पर एक अभिनव रंगमिति IC-RT-LAMP और IC-RT-PCR प्रोटोकॉल का उपयोग किया गया और इसे अनुकूलित किया गया। सबसे पहले, 95 संदिग्ध नमूनों वाले संग्रह में वायरस का पता लगाने के लिए DAS-ELISA परख की गई। अंत में, पाँच नमूनों को सकारात्मक नमूने के रूप में पहचाना गया। फिर, सकारात्मक नमूनों को आणविक विधियों द्वारा सत्यापित किया गया। इस संबंध में, सभी चार आरटी-एलएएमपी प्राइमरों (यानी एफ3, बी3, एफआईपी और बीआईपी) के साथ आरटी-पीसीआर प्राइमरों (एफ और बी) को पीवीवाई जीनोम के कोट प्रोटीन जीन (सीपी) के आधार पर चुना गया था। भले ही डीएएस-एलिसा, आरटी-पीसीआर और आरटी-एलएएमपी परख सकारात्मक संक्रमित पौधे के नमूनों का सफलतापूर्वक पता लगा सकते थे, समय, सुरक्षा, संवेदनशीलता, लागत और सादगी पर विचार करते हुए, अंतिम कुल मिलाकर बेहतर था। इसके अलावा, परिणामों ने प्रदर्शित किया कि आरटी-एलएएमपी परख आरटी-पीसीआर की तुलना में 100 गुना संवेदनशील और 3 गुना तेज था। एलएएमपी परख पानी के स्नान में किसी भी थर्मल साइक्लर मशीन या परिष्कृत प्रयोगशालाओं की सुविधा से मुक्त रूप से पूरा किया गया था। इस बीच, आईसी-आरटी-एलएएमपी उत्पादों का सटीक रूप ^से पता लगाने के लिए छह अलग-अलग दृश्य रंगों में तदनुसार हम इस वर्णमिति परख को पीवीवाई पहचान और संभवतः अन्य वायरल-आधारित रोगों के संबंध में एक अत्यधिक विश्वसनीय वैकल्पिक वायरल पहचान प्रणाली के रूप में प्रस्तावित करते हैं।