जीन प्रौद्योगिकी

अमूर्त

मोनोमेरिक प्रोटीन डोमेन का लक्षण वर्णन जो rRNA जीन के भीतर अत्यधिक संरक्षित 100-Bp DNA लक्ष्य से विशेष रूप से जुड़ते हैं

एलोडी कार्नस, मैरी-वेरोनिक डेमाटेई, सोफी कैस्टरेट, गिलाउम कारपेंटियर, फैबियन पलाज़ोली, सोलेन बिरे, क्रिस्टोफ़ ब्रेसैक और यवेस बिगोट

अवधारणा के प्रमाणों से पता चला है कि राइबोसोमल आरएनए (आरआरएनए) को एनकोड करने वाले गुणसूत्र जीन क्लस्टर जीन डिलीवरी एकीकरण लोकी का गठन करते हैं जो ट्रांसजीन अभिव्यक्ति के लिए इष्टतम हैं। हालाँकि, चूँकि जानवरों में इन जीनों में डीएनए खंडों को एकीकृत करने के लिए समजातीय पुनर्संयोजन कुशल है, इसलिए rRNA जीन के तत्काल आसपास के अणुओं को लक्षित करने में सक्षम प्रणालियों का निर्माण करने के लिए नए आणविक उपकरणों की आवश्यकता है।

 हमने कई डीएनए बाइंडिंग डोमेन (डीबीडी) के गुणों की जांच की जो आरआरएनए जीन के 100-बीपी क्षेत्र के भीतर एक मोटिफ को विशेष रूप से पहचानने में सक्षम हैं जो यूकेरियोट्स के बीच 99-100% संरक्षित है। हमारे निष्कर्ष दर्शाते हैं कि R2 गैर-LTR रेट्रोट्रांसपोसन द्वारा एन्कोड किए गए एंडोन्यूक्लिअस से उत्पन्न दो Myb-जैसे DBD आशाजनक उम्मीदवार हैं क्योंकि वे i) उच्च आत्मीयता के साथ, अपेक्षित जीनोमिक rDNA लक्ष्य के भीतर स्थित 20-बीपी बाइंडिंग साइट को विशेष रूप से पहचानते हैं, ii) मोनोमर्स के रूप में कार्य करते हैं, iii) एक परमाणु स्थानीयकरण संकेत रखते हैं, iv) किसी अन्य डोमेन से जुड़े होने पर कार्यात्मक बने रहते हैं और, v) जिस प्रोटीन से जुड़े होते हैं उसकी कार्यक्षमता को नहीं बदलते हैं। हालांकि, कई R2DBD संलयन के साथ विवो में प्राप्त परिणाम बताते हैं कि इन DBD को rRNA जीन में निर्देशित आणविक लक्ष्यीकरण प्रणाली में एकीकृत करने से पहले दो गुणों को इंजीनियर किया जाना बाकी है। पहला R2DBD की न्यूक्लियोलस के भीतर स्थित होने की क्षमता से संबंधित है, वह अंग जिसमें rRNA जीन रहते हैं। दूसरा R2DBD की नाभिक के कुछ हिस्सों में जमा होने की प्रवृत्ति है, जो नाभिक के भीतर इसके प्रसार को सीमित करता है। इन मौजूदा सीमाओं को दरकिनार करने के लिए समाधानों पर चर्चा की गई है। हमारे परिणाम R2DBD गुणों और नाभिक के भीतर प्लास्मिड डीएनए के लक्ष्यीकरण के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान करते हैं। उन्हें तीन पहलुओं से आगे विश्लेषण करने की आवश्यकता होगी; R2DBDs के अप्रयुक्त लाभ, गैर-वायरल वेक्टर के एकीकरण को लक्षित करने के लिए फ्यूजन पेप्टाइड्स की संभावनाएं और सीमाएं, और वैक्टर को लक्षित करने के लिए फ्यूजन पेप्टाइड्स के विकल्प।