फार्मास्युटिका एनालिटिका एक्टा

अमूर्त

एक त्रि-आयामी कोलेजन जेल संकुचन निगरानी प्रणाली जो एंटी-इंट्राओकुलर प्रेशर एजेंटों की स्क्रीनिंग के लिए एक पोर्सिन ट्रैबेकुलर मेशवर्क का उपयोग करती है

हिरोयोशी कसाई, मित्सु इशिसाका, इइची शिरासावा और हिदेकी हारा

माना जाता है कि ट्रेबिकुलर मेशवर्क (TM) संकुचनशील अवस्था जलीय द्रव के बहिर्वाह और अंतःकोशिकीय दबाव (IOP) को प्रभावित करती है। यह सुझाव दिया गया है कि TM विश्राम ऊतक छिद्रता को बढ़ाकर पारंपरिक बहिर्वाह को बढ़ा सकता है और IOP में गिरावट ला सकता है, इसलिए, यह ग्लूकोमा के लिए एक चिकित्सीय लक्ष्य हो सकता है। तदनुसार, हमने तीन-आयामी (3-डी) कोलेजन जेल परख का उपयोग करके सुसंस्कृत पोर्सिन ट्रेबिकुलर मेशवर्क (pTM) कोशिकाओं की संकुचनशीलता पर विभिन्न एजेंटों के प्रभावों की जांच की, ताकि नए एंटी-IOP एजेंटों की पहचान करने के लिए एक स्क्रीनिंग विधि विकसित की जा सके। हमने पोर्सिन नेत्रगोलक से प्राप्त pTM कोशिकाओं की पहचान कोशिका के आकार और कम घनत्व वाले लिपोप्रोटीन (LDL) रिसेप्टर्स की अभिव्यक्ति द्वारा की। कोलेजन जैल में एम्बेडेड होने पर pTM कोशिकाओं ने भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) की सांद्रता पर निर्भर संकुचनशील गतिविधि दिखाई। विभिन्न काइनेज अवरोधकों, विशेष रूप से सेल साइक्लिन-आश्रित काइनेज (रेस्कोविटीन), आरएचओ और सीए2+-आश्रित प्रोटीन काइनेज (वाई-27632), टायरोसिन काइनेज (टाइरफॉस्टिन एजी879), फॉस्फेटिडिलिनोसिटॉल 3-काइनेज (बिसइंडोलिमेलिमाइड I, बीआईएम I), और सीए2+/कैल्मोडुलिन काइनेज (चेलेरिथ्रिन) के अवरोधकों ने कोलेजन जेल संकुचन को दृढ़ता से बाधित किया। इस संकुचन को एथैक्रिनिक एसिड, Na+, K+-ATPase (ओउबैन), Ca2+-ATPase (थैप्सिगारगिन) और 3-हाइड्रॉक्सी-3-मिथाइलग्लूटारील कोएंजाइम A (HMG-CoA) रिडक्टेस के अवरोधकों, एक गैर-चयनात्मक फॉस्फोडाइस्टरेज़ अवरोधक (पैपावरिन) और एडेनोसिन A2 (मेट्रिफ़ुडिल) और कैनाबिनोइड रिसेप्टर (CP-55940) एगोनिस्ट द्वारा भी बाधित किया गया था। इसके अलावा, BIM I, सिमवास्टेटिन, BQ-123 और CP-55940 ने आंशिक साइटोटॉक्सिसिटी का प्रदर्शन किया। चेलेरिथ्रिन और थैप्सिगारगिन की निरोधात्मक गतिविधियों को भी साइटोटॉक्सिसिटी के लिए जिम्मेदार ठहराया गया। ये निष्कर्ष संकेत देते हैं कि इस इन विट्रो 3-डी कोलेजन जेल संकुचन निगरानी प्रणाली का उपयोग pTM सेल विश्राम को प्रेरित करने वाले नए एजेंटों की पहचान करने के लिए एक तेज़ और संवेदनशील स्क्रीनिंग विधि के रूप में किया जा सकता है और साथ ही मुख्य और साइड इफ़ेक्ट दोनों का पता लगा सकता है।