जर्नल ऑफ बैक्टीरियोलॉजी एंड पैरासिटोलॉजी

अमूर्त

रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन लूप मध्यस्थता आइसोथर्मल प्रवर्धन का उपयोग करके मानव जीका वायरस का एक सरल दृश्य पता लगाने की विधि

यांग ली1,2, झेंझोउ वान3, यी झोउ2,4, ज़िया जिन5, हैफेंग शि1* और चियू झांग 2*

जीका वायरस (ZIKV) एक उभरता हुआ मच्छर जनित रोगज़नक़ है, और यह फ़्लेविविरिडे परिवार, जीनस फ़्लेविवायरस से संबंधित है। ZIKV संक्रमण माइक्रोसेफली और पुरुष बांझपन से जुड़ा था। मानव प्रजनन स्वास्थ्य और वायरस के प्रसार के नियंत्रण के लिए ZIKA संक्रमण की निगरानी महत्वपूर्ण है। चीन और अन्य दक्षिण-पूर्व एशियाई देशों के लिए ZIKV का पता लगाने के लिए एक तेज़ और संवेदनशील परख का विकास तत्काल आवश्यक है। यहाँ, हमने ZIKV का पता लगाने के लिए एक-चरण, सिंगल-ट्यूब रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल एम्पलीफिकेशन (RT-LAMP) परख विकसित की है। परख में 25 μl प्रतिक्रिया में जीका RNA की 88 प्रतियों की पहचान (LOD) की सीमा है, और जब टेम्पलेट इनपुट LOD से अधिक होता है, तो इसे 20 मिनट के भीतर पूरा किया जा सकता है। इसके अलावा, यह उच्च विशिष्टता और अच्छी प्रजनन क्षमता प्रदर्शित करता है। महत्वपूर्ण रूप से, परिणाम को HNB या कैल्सीन का उपयोग करने पर रंगमिति परिवर्तन द्वारा देखा जा सकता है। परख की व्यवहार्यता का मूल्यांकन करने के लिए, 20 सेल कल्चर सुपरनैटेंट्स और तीन मूत्र नमूनों का उपयोग करके RT-LAMP परख और अधिक रूपांतरणीय RT-qPCR के बीच तुलना की गई। ZIKV RT-LAMP ने RT-qPCR के साथ पता लगाने में पूर्ण सहमति दिखाई। ये परिणाम दर्शाते हैं कि नव विकसित ZIKV RT-LAMP सरल, तेज़ और ZIKV निगरानी के लिए उपयुक्त है, खासकर संसाधन-सीमित क्षेत्रों में।