जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

चूजे के संपूर्ण भ्रूण संवर्धन का उपयोग करके संभावित चूहे और मानव निश्चित एंडोडर्म के लिए एक कार्यात्मक परख

मार्टिना जोहानसन, हेनरिक सेम्ब, पैले सेरुप और मैटियास हैनसन

परिचय: भ्रूण स्टेम सेल (ESCs) मधुमेह जैसी अपक्षयी बीमारियों के इलाज के लिए एक संभावित कोशिका स्रोत का प्रतिनिधित्व करते हैं। कई अध्ययनों ने भ्रूणजनन के दौरान होने वाली सिग्नलिंग घटनाओं को फिर से दोहराने का प्रयास करके इस कोशिका स्रोत से निश्चित एंडोडर्म (DE) की पीढ़ी को संबोधित किया है। हालाँकि, DE का बाद का विभेदन कार्यात्मक इंसुलिन-उत्पादक बीटा कोशिकाओं को उत्पन्न करने में विफल रहा है। यह सुनिश्चित करने के लिए कि हमारे पास सही प्रारंभिक सामग्री है, हमें यह आकलन करके ESC-व्युत्पन्न DE को पूरी तरह से चिह्नित करने की आवश्यकता है कि क्या कोशिकाएँ इन विवो समकक्ष के कार्यात्मक रूप से समतुल्य हैं। इस प्रकार, इस अध्ययन का उद्देश्य एक ऐसी विधि का वर्णन करना है जिसके द्वारा ESCs से प्राप्त DE की इन विवो कार्यक्षमता का आकलन किया जा सके।

विधियाँ: निर्देशित विभेदन द्वारा, मानव और माउस ESCs से संभावित DE प्राप्त किया गया। एकीकरण की किसी भी घटना को निर्धारित करने के लिए इस संभावित DE को बाद में चूजे के भ्रूण के एंडोडर्म में प्रत्यारोपित किया गया। संभावित DE का विश्लेषण प्रत्यारोपण से पहले और प्रत्यारोपण के 48 घंटे बाद जीन और प्रोटीन अभिव्यक्ति द्वारा किया गया।

परिणाम: चूहे और मानव ESC से प्राप्त संभावित DE को चूजे के एंडोडर्म में सफलतापूर्वक एकीकृत किया गया। एकीकरण से पहले संभावित DE में एंडोडर्म-विशिष्ट जीन व्यक्त किए गए और प्रत्यारोपण के 48 घंटे बाद एंडोडर्म-विशिष्ट प्रोटीन का मूल्यांकन किया गया।

निष्कर्ष: हम ESCs से प्राप्त संभावित DE को प्रत्यारोपित करने की विस्तृत कार्यप्रणाली का वर्णन करते हैं, और उसके बाद ग्राफ्ट की गई कोशिकाओं के प्रवास और विकास का विश्लेषण करते हैं। हमारे परिणाम बताते हैं कि संभावित DE चिकन एंडोडर्म के साथ एकीकृत होता है और चिकन आंत के विकास में भाग लेता है, जो ESCs से कार्यात्मक DE की पीढ़ी को दर्शाता है। इस कार्यात्मक परख का उपयोग मानव और माउस ESCs दोनों से प्राप्त कार्यात्मक DE की पीढ़ी का आकलन करने के लिए किया जा सकता है और यह कोशिका लक्षण वर्णन के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रदान करता है। यह पूरी तरह कार्यात्मक बीटा कोशिकाओं की ओर भेदभाव प्रक्रिया में एक महत्वपूर्ण प्रारंभिक कदम है।