जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

चूहे के वृषण में बुसल्फान उपचार के बाद बहुत छोटी भ्रूण जैसी स्टेम कोशिकाएँ जीवित रहती हैं और शुक्राणुजनन को बहाल करती हैं

संध्या आनंद, दीपा भारतीय, कल्पना श्रीरामन, हिरेन पटेल और मंजरामकर डीडी

अध्ययन के उद्देश्य: वयस्क स्तनधारी वृषण में शुक्राणुजन्य स्टेम कोशिकाओं (SSCs) के साथ-साथ निष्क्रिय, बहुलतापूर्ण, बहुत छोटे भ्रूण जैसे स्टेम कोशिकाओं (VSELs) की एक नई आबादी होती है। वर्तमान अध्ययन (i) वृषण VSELs की विशेषता निर्धारित करने (ii) VSELs और SSCs पर कीमोथेरेपी के विभेदक प्रभाव की जांच करने और (iii) स्वस्थ दैहिक सूक्ष्म वातावरण प्रदान करके जीवित VSELs की विभेदन क्षमता को बहाल करने के लिए किया गया था।
विधियाँ: माउस वृषण पर बुसल्फान (25 मिलीग्राम/किग्रा) के प्रभाव का अध्ययन किया गया। सिंजेनिक सर्टोली कोशिकाओं (प्रति वृषण 105 कोशिकाएँ) और अस्थि मज्जा से प्राप्त मेसेनकाइमल कोशिकाओं (प्रति वृषण 104 कोशिकाएँ) को इंटरट्यूबुलर मार्ग के माध्यम से अलग-अलग प्रत्यारोपित किया गया। जर्म सेल मार्कर MVH और PCNA के ऊतक विज्ञान और प्रतिरक्षा-स्थानीयकरण द्वारा दो महीने बाद आला पुनर्निर्माण के प्रभाव का अध्ययन किया गया। इन विट्रो में अंडकोशिकाओं को निषेचित करने की उनकी क्षमता के लिए दुम के शुक्राणुओं का मूल्यांकन किया गया।
परिणाम: VSELs का आकार 2-6 μm था, SCA-1+/CD45-/LIN-, उच्च न्यूक्लियो-साइटोप्लाज्मिक अनुपात था और इसमें वृषण कोशिकाओं का 0.03% हिस्सा शामिल था जबकि SSC विशिष्ट मार्कर GFRa एक अलग, बड़ी कोशिका आबादी पर स्थानीयकृत था। बुसल्फान ने चुनिंदा रूप से SSCs और अन्य रोगाणु कोशिकाओं को नष्ट कर दिया, हालांकि, परमाणु OCT-4A, नैनोग, Sox-2 और SCA-1 पॉजिटिव VSELs (0.06%) बच गए। स्थायी VSELs संभवतः विभेदित करने में असमर्थ थे क्योंकि कीमोथेरेपी ने सर्टोली कोशिकाओं वाले 'आला' को भी प्रभावित किया था। सर्टोली और मेसेनकाइमल कोशिकाओं के प्रत्यारोपण के दो महीने बाद शुक्राणुजनन की पूर्ण बहाली देखी गई। प्रत्यारोपित कोशिकाओं ने जीवित नलिकाओं के आसपास के क्षेत्र में नव-नलिकाएं बनाईं और संभवतः VSELs प्रसार और विभेदन के लिए आवश्यक विकास कारकों का स्रोत थीं। प्रत्यारोपित समूह में MVH और PCNA दोनों ने धुंधलापन बढ़ाया। क्यूआरटी-पीसीआर अध्ययनों से बुसल्फान उपचारित वृषण में एक अर्धसूत्रीविभाजन अवरोध की मौजूदगी का पता चला, जिसे प्रत्यारोपण के बाद दूर किया गया। परिणामी शुक्राणु एपिडीडिमिस में आगे बढ़े, सामान्य गतिशीलता और इन विट्रो में निषेचन की क्षमता दिखाई।
निष्कर्ष: परिणाम बताते हैं कि वीएसईएल कीमोथेरेपी से बच जाते हैं और जर्म सेल से रहित चूहों में शुक्राणुजनन को बहाल कर सकते हैं। परिणाम कैंसर से बचे लोगों की प्रजनन संबंधी समस्याओं को संबोधित करने के लिए सीधे प्रासंगिक हैं।