कार्सिनोजेनेसिस और उत्परिवर्तन जर्नल

अमूर्त

वेक्टर-आधारित let-7a miRNAs SK-N-MC और SHEP न्यूरोब्लास्टोमा कोशिकाओं में कई ऑन्कोजीन के दमनकर्ता के रूप में कार्य करते हैं

गुआन जे, गुओ एस, ज़ेंग एक्स, लुओ वाई, यांग टी और काओ जे

उद्देश्य: यह अध्ययन न्यूरोब्लास्टोमा सेल लाइनों में वेक्टर-आधारित लेट-7 ए एमआरएनए के ट्यूमर-विरोधी प्रभाव को निर्धारित करने के लिए डिज़ाइन किया गया था।
विधियाँ: एक टेट्रासाइक्लिन (टेट)-प्रेरित लेट-7 ए अभिव्यक्ति वेक्टर का निर्माण किया गया और इसका उपयोग SKN- MC और SHEP न्यूरोब्लास्टोमा कोशिकाओं को स्थिर रूप से संक्रमित करने के लिए किया गया। टेट्रासाइक्लिन द्वारा प्रेरित लेट-7 ए ओवरएक्सप्रेशन के सेल प्रसार और आसंजन पर प्रभावों का MTT परख और आसंजन परख द्वारा इन विट्रो में विश्लेषण किया गया। लेट-7 लक्ष्य ऑन्कोजीन NRAS, KRAS, c-myc और HMGA2 की mRNA अभिव्यक्ति की मात्रात्मक वास्तविक समय रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा जाँच की गई। N-RAS, K-RAS, c-Myc, HMGA2, NeuN और β3- ट्यूबुलिन के प्रोटीन अभिव्यक्ति का विश्लेषण वेस्टर्न ब्लॉट और इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री का उपयोग करके किया गया। SK-N-MC और SHEP कोशिकाओं की आकृति विज्ञान का भी अवलोकन किया गया। इसके अतिरिक्त, let-7a-प्रेरित वेक्टर-ट्रांसफ़ेक्टेड SHEP कोशिकाओं को नग्न चूहों में चमड़े के नीचे इंजेक्ट किया गया, और विवो में ट्यूमर के विकास का भी मूल्यांकन किया गया।
परिणाम: Let-7a अभिव्यक्ति न्यूरोब्लास्टोमा कोशिकाओं में महत्वपूर्ण रूप से प्रेरित हुई और SK-N-MC और SHEP कोशिकाओं में कोशिका प्रसार और आसंजन को बाधित किया। Let-7a ने SK-N-MC और SHEP कोशिकाओं में β3-ट्यूबुलिन और न्यूएन अभिव्यक्ति को बढ़ाया। हालाँकि, छोटी न्यूराइट जैसी वृद्धि केवल SK-N-MC कोशिकाओं में देखी गई, लेकिन SHEP कोशिकाओं में नहीं। Let-7a की अधिक अभिव्यक्ति ने SK-N-MC और SHEP कोशिकाओं में N-RAS और HMGA2 प्रोटीन की अभिव्यक्ति को कम कर दिया। SK-N-MC कोशिकाओं में c-Myc अभिव्यक्ति भी कम हो गई। टेट-प्रेरित समूह में SHEP ज़ेनोग्रैफ़्ट के ट्यूमर का आकार टेट्रासाइक्लिन प्रेरण के बिना चूहों की तुलना में छोटा था।
निष्कर्ष: कुल मिलाकर, हमारे डेटा मल्टीऑन्कोजीन के खिलाफ़ SK-N-MC और SHEP न्यूरोब्लास्टोमा कोशिकाओं में वेक्टर-आधारित let-7a miRNA ओवरएक्सप्रेशन के एंटी-ट्यूमर प्रभावों को प्रदर्शित करते हैं। Let-7a miRNA न्यूरोब्लास्टोमा के उपचार के लिए एक संभावित चिकित्सीय अणु है।