जर्नल ऑफ बैक्टीरियोलॉजी एंड पैरासिटोलॉजी

अमूर्त

EhPgp1 ​​जीन कोर प्रमोटर में URE4-जैसे अनुक्रम द्वारा ट्रांसक्रिप्शनल सक्रियण

एमई रामिरेज़, डीजी पेरेज़, ई नादेर और सी गोमेज़

EhPgp1 ​​एंटामोइबा हिस्टोलिटिका से दवा प्रतिरोधी ट्रोफोजोइट्स में व्यक्त बहुऔषधि प्रतिरोध जीनों में से एक है। हमारी प्रयोगशाला में पिछले अध्ययनों ने प्रदर्शित किया है कि दो C/EBP साइट्स इस जीन के ट्रांसक्रिप्शनल सक्रियण में भाग लेते हैं। हालाँकि एक अन्य प्रासंगिक क्षेत्र भी है जो क्लोन C2 में EhPgp1 ​​अभिव्यक्ति के विनियमन को नियंत्रित करता है। इस रिपोर्ट में हम सबूत देते हैं कि EhPgp1 ​​जीन का प्रतिलेखन कम से कम आंशिक रूप से सिस-एक्टिंग R9 दोहराए गए अनुक्रमों और EhEBP1 प्रोटीन द्वारा विनियमित होता है। -234 से -197 बीपी तक के क्षेत्र का संरचनात्मक विश्लेषण -226 से -203 बीपी पर स्थित 9 बीपी [R9(1) और R9(2)] के दो दोहराए गए अनुक्रमों की उपस्थिति को दर्शाता है। R9 रूपांकनों के विलोपन और उत्परिवर्तन विश्लेषण ने क्लोन C2 से ट्रोफोजोइट्स में प्रमोटर गतिविधि को काफी कम कर दिया। EMSA प्रयोगों ने E. हिस्टोलिटिका से R9 अनुक्रम में परमाणु प्रोटीन के विशिष्ट बंधन का खुलासा किया। जबकि प्रतियोगिता परीक्षणों से पता चला कि एक मजबूत डीएनए-प्रोटीन इंटरैक्शन के लिए एक से अधिक R9 अनुक्रमों की उपस्थिति आवश्यक है। इसके अलावा, आंशिक रूप से शुद्ध प्रोटीन के साथ वेस्टर्न ब्लॉट प्रयोगों ने R9 रूपांकन और EhEBP1 के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ बातचीत की, 28 kDa प्रोटीन को पहचाना। दिलचस्प बात यह है कि सुपरशिफ्ट परख में इस एंटीबॉडी ने अमीबा से R9 अनुक्रमों और परमाणु प्रोटीन के डीएनए-प्रोटीन इंटरैक्शन गठन को रोका, यह दर्शाता है कि R9 तत्व के साथ बातचीत करने वाले प्रोटीन में से एक EhEBP1 जैसा है। निष्कर्ष में, हम प्रदर्शित करते हैं कि R9 रूपांकनों को EhEBP1 प्रोटीन द्वारा पहचाना जाता है और EhPgp1 ​​जीन अभिव्यक्ति को सक्रिय करता है।