तातियाना लोपेटिना, ऑरोरा माज़ेओ, स्टेफ़ानिया ब्रूनो, सिरो टेटा, नतालिया कलिनिना, रेनाटो रोमाग्नोली, माउरो सालिज़ोनी, मास्सिमो पोर्टा और जियोवानी कैमुसी
उद्देश्य: वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य संस्कृति में वसा-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं (ASCs) द्वारा स्रावित बाह्य कोशिकीय पुटिकाओं (EVs) के एंजियोजेनिक गुणों पर मूल फाइब्रोब्लास्ट वृद्धि कारक (bFGF) के प्रभावों की जांच करना था।
विधियाँ: हमने bFGF (FGF-EVs) या बिना bFGF (b-EVs) के साथ संवर्धित ASC (ASC-EVs) से EVs को अलग किया। हमने इन विट्रो में केशिका जैसी संरचना निर्माण परख द्वारा मानव माइक्रोवैस्कुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं (HMEC) पर EV एंजियोजेनिक क्रिया की तुलना की और SCID चूहों में HMEC युक्त मैट्रिजेल के उपचर्म इंजेक्शन द्वारा इन विवो में तुलना की। हमने PCR सरणी द्वारा EVs की माइक्रो-RNA संरचना का विश्लेषण किया और हमने bFGF उत्तेजना के बाद बदले गए दो mi-RNAs का चयन किया: miR-223 और miR-21। हमने ईवीएस की कार्रवाई की क्षतिपूर्ति के लिए एचएमईसी को लघु एंटीसेंस एंटी-एमआईआर-२२३ या मिमिक एमआईआर-२१ के साथ संक्रमित किया।
परिणाम: इन विट्रो में, एफजीएफ-ईवी उत्तेजित एचएमईसी द्वारा गठित वाहिका-जैसी संरचनाओं की कुल लंबाई और शाखाओं की संख्या बी-ईवी उत्तेजना के संबंध में काफी कम हो गई थी और संरचनाएं बी-ईवी उत्तेजना के बाद की तुलना में काफी बड़ी थीं। विवो में, एफजीएफ-ईवी-उत्तेजित एचएमईसी द्वारा गठित वाहिकाएं बी-ईवी-उत्तेजित एचएमईसी द्वारा गठित वाहिकाओं की तुलना में संख्या में काफी कम थीं, लेकिन वे आकार में काफी बड़ी थीं और उनमें माउस की चिकनी मांसपेशी एक्टिन के लिए सकारात्मक कोशिकाएं थीं। हमने पाया कि बीएफजीएफ ने एएससीईवी में आणविक परिवर्तनों को जन्म दिया, जिसकी विशेषता एंजियोजेनिक कारकों की अभिव्यक्ति में कमी थी। FGFEVs के प्रभावों को miR-233 के अवरोधन और miR-21 नकल द्वारा प्रतिपक्षी बनाया गया था
निष्कर्ष: परिणाम संकेत देते हैं कि संस्कृति की स्थिति ASC व्युत्पन्न EVs की प्रो-एंजियोजेनिक गतिविधि को संशोधित कर सकती है, जिससे उनके प्रोटीन और RNA सामग्री में बदलाव आ सकता है। विशेष रूप से, bFGF EVs के उत्पादन को प्रेरित करता है जो वाहिका संख्या में वृद्धि के बजाय वाहिका स्थिरीकरण को उत्तेजित करता है।