मौखिक स्वास्थ्य और दंत प्रबंधन

अमूर्त

ओरल म्यूकोसा संयोजी ऊतक कोशिकाओं के अलगाव और विस्तार का मानकीकरण

फर्नांडीस एलए, नैसिमेंटो बीएल, लुकाटो-बुडज़ियाक एमसी, फिगुएरेडो सीएम, कार्नेइरो ई

उद्देश्य: इस अध्ययन का उद्देश्य भविष्य के बायोइंजीनियरिंग प्रोटोकॉल के लिए मौखिक म्यूकोसा के संयोजी ऊतक से फाइब्रोमेसेनकाइमल सेल आबादी के अलगाव और विस्तार के लिए एक प्रोटोकॉल स्थापित करना था। तरीके: फाइब्रोब्लास्ट और प्रोजेनिटर कोशिकाओं के अलगाव के लिए, हमने मौखिक सर्जरी के संकेत वाले रोगियों से सर्जिकल नमूनों के टुकड़ों का इस्तेमाल किया। अलगाव के लिए प्रोटोकॉल इस प्रकार था: ऊतक को फॉस्फेट-बफर सलाइन (पीबीएस) से धोया गया था जिसमें एंटीबायोटिक-एंटीमाइकोटिक (पीएसए) की खुराक दी गई थी। ऊतक को कोलेजनेज टाइप II युक्त एक टेस्ट ट्यूब में रखा गया था और रात भर ओवन में रखा गया था। ऊष्मायन के बाद, कोलेजनेज एकत्र किया गया और ऊतक को फिर से एक बार पीबीएस + पीएसए से धोया गया। इसके बाद, कॉलोनी-फॉर्मिंग यूनिट (सीएफयू) परीक्षण किया गया। कोशिकाओं (1.0 × 105) को 10 सेमी² के डिश पर रखा गया था जिसमें उच्च ग्लूकोज के साथ डल्बेको का संशोधित ईगल माध्यम (डीएमईएम) था, जिसे 10% फीटल बोवाइन सीरम (एफबीएस) के साथ पूरक किया गया था। कोशिकाओं को 10% फॉर्मेलिन के साथ स्थिर किया गया था और कॉलोनियों की गिनती करने से पहले क्रिस्टल वायलेट से रंगा गया था। परख तीन प्रतियों में किया गया था। परिणाम: सभी नमूनों की कोशिकाओं ने एक विशिष्ट ताराकार उपस्थिति के साथ एक सजातीय आकृति विज्ञान दिखाया। एकमात्र अंतर बनने वाली कॉलोनियों की संख्या में था। दिन 0 पर बनने वाली कॉलोनियों की तुलना में दिन 1 पर बनने वाली कॉलोनियों की संख्या में उल्लेखनीय वृद्धि हुई थी, और दिन 2 पर बनने वाली कॉलोनियों की तुलना में महत्वपूर्ण कमी आई थी। निष्कर्ष: मानव मौखिक म्यूकोसा से प्राप्त फाइब्रोब्लास्ट की प्राथमिक संस्कृति के लिए एक प्रोटोकॉल स्थापित करना संभव था।