आधुनिक रसायन विज्ञान एवं अनुप्रयोग

अमूर्त

वाष्पीकरण चरण के बिना सीरम रिबाविरिन सांद्रता निर्धारित करने के लिए लघु और मजबूत एचपीएलसी-यूवी विधि

अब्दुल रफीक खान, अली अल-ओथैम, खालिद मुहम्मद खान, शाज़िया मरतज़ा, सारा अल्ट्राइफ, वलीद तमीमी, वकास जमील और इब्राहिम अल्ट्राइफ

उद्देश्य: हेपेटाइटिस सी के रोगी में चिकित्सीय दवा की निगरानी के लिए रिबाविरिन (आरबीवी) का मापन महत्वपूर्ण है। वाष्पीकरण चरण के बिना सीरम नमूनों में रिबाविरिन सांद्रता को मापने के लिए एक सरल और तेज़ उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) विधि विकसित और मान्य की गई है।

डिजाइन और विधि: लगभग 500 μl सीरम नमूना, 50 μl आंतरिक मानक और 20 mM अमोनियम एसीटेट बफर (pH=8.5) को 30 सेकंड के लिए मिलाया गया और सेंट्रीफ्यूज किया गया। ठोस चरण निष्कर्षण के लिए सतह पर तैरनेवाला को प्रीकंडीशन्ड फेनिल बोरोनिक एसिड कार्ट्रिज में स्थानांतरित किया गया। सभी कार्ट्रिज को 10 psi से अधिक नहीं वैक्यूम के तहत 20 mM अमोनियम एसीटेट बफर के 1 mL से दो बार धोया गया। रिबाविरिन और आंतरिक मानक को 3% फॉर्मिक एसिड के 300 μl के साथ निकाला गया। HPLC सिस्टम में 100 μl का एक एलिक्वॉट इंजेक्ट किया गया।

परिणाम: विधि 0.1-8.0 mg/l की सीमा में रैखिक थी, जिसमें 0.05 mg/l पता लगाने की सीमा थी। विधि तुलना का सहसंबंध गुणांक 0.975 था, जिसका p मान 0.116 था, जो परिणामों की अच्छी पुनरुत्पादकता दर्शाता है। औसत सटीकता की जाँच तीन अलग-अलग सांद्रताओं पर की गई और सभी तीन स्तरों के लिए 107-110% के बीच पाई गई। 0.1-8.0 mg/l की सीमा में रिबाविरिन के लिए निष्कर्षण दक्षता 65.5% और 50 mg/l पर आंतरिक मानक के लिए 71.2% थी। इंट्रा परख परिशुद्धता 0.5, 2.5 और 5.0 mg/l पर निर्धारित की गई और % CV क्रमशः 2.2%, 5.0%, 4.5% पाया गया। तीन स्तरों पर इंजेक्शन पुनरुत्पादकता 5.5%, 6.1% और 3.3% थी। गुरुत्वाकर्षण प्रवाह और वाष्पीकरण चरण को हटाने से यह विधि रिबाविरिन नमूनों के नियमित विश्लेषण के लिए अधिक तीव्र और आसान हो गई।

निष्कर्ष: नव विकसित HPLC विधि तेज़, सटीक और संवेदनशील थी। इसका उपयोग हमारे अस्पताल में हेपेटाइटिस सी के रोगी में सीरम रिबाविरिन स्तर निर्धारित करने के लिए किया गया।