पद्मा सिंह और ऋचा प्रसाद
पेनिसिलियम द्वारा बीज संक्रमण न केवल बीज की गुणवत्ता को कम करता है बल्कि नट्स को मानव उपभोग के लिए असुरक्षित भी बनाता है। पेनिसिलियम के पृथक्करण के लिए CDA (Czapek Dox Agar) माध्यम का उपयोग करके प्रत्यक्ष प्लेट विधि का उपयोग किया गया था, प्लेट में देखी गई कॉलोनी बनाने वाली (CFU) इकाइयों की कुल संख्या 13 थी। पेनिसिलियम स्ट्रेन की पहचान लैक्टोफेनॉल कॉटन ब्लू स्टेनिंग द्वारा की गई थी। पेनिसिलियम को CD शोरबा में डाला गया ताकि इसकी वृद्धि और साथ ही माइकोटॉक्सिन उत्पादन को 5, 10, 15, 20 दिनों की अलग-अलग अवधि में मापा जा सके। मेटाबोलाइट में हिस्टिडीन के रूप में अमीनो एसिड की पहचान करने के लिए पेपर क्रोमैटोग्राफी का उपयोग किया गया था। माइकोटॉक्सिन उत्पादन की पुष्टि थिन लेयर क्रोमैटोग्राफी (TLC) द्वारा की गई और एक स्पॉट की पहचान की गई, जो दृश्यमान प्रकाश में नीला था और UV प्रकाश में हल्का नीला था। इसने मानक के साथ तुलना करने पर कल्चर मेटाबोलाइट में एफ्लाटॉक्सिन B2 की उपस्थिति का संकेत दिया। फंगस के खिलाफ एंटीबॉडी की मौजूदगी का आकलन करने के लिए एलिसा का भी इस्तेमाल किया गया और कल्चर मेटाबोलाइट में माइकोटॉक्सिन के स्तर का पता लगाने के लिए भी इसका इस्तेमाल किया गया। मानक वक्र से, यह देखा गया कि सीरम नमूने में पेनिसिलियम के लिए कोई एंटीबॉडी नहीं थी और मरीज पेनिसिलियम के संक्रमण से मुक्त था क्योंकि कल्चर मेटाबोलाइट में माइकोटॉक्सिन का स्तर कम था।