जैव रसायन एवं विश्लेषणात्मक जैव रसायन

अमूर्त

रैम शुक्राणुओं की इन विट्रो कैपेसिटेशन और एक्रोसोम प्रतिक्रिया के दौरान लिपिड राफ्ट्स की रीमॉडलिंग

कारमेन कोलास, रोसौरा पेरेज़-पे, एड्रियाना कासाओ, मारियो ओलेरो, लूसिया कैलेजा, मार्गरीटा गैलेगो, टेरेसा मुइनो-ब्लैंको और जोस ए सेब्रियन-पेरेज़

पृष्ठभूमि: लिपिड राफ्ट को अक्सर डिटर्जेंट-प्रतिरोधी माइक्रोडोमेन (DRM) के रूप में जाना जाता है। हम पहली बार मेढ़े के शुक्राणु की सतह पर दो लिपिड राफ्ट मार्कर, कैवोलिन-1 और गैंग्लियोसाइड GM1 की उपस्थिति और इन मार्कर वितरण, प्रोटीन सामग्री और DRM और गैर-DRM अंशों की लिपिड संरचना पर इन विट्रो कैपेसिटेशन और एक्रोसोम प्रतिक्रिया के प्रभाव की रिपोर्ट करते हैं।

विधियाँ: कैवोलिन-1 और गैंग्लियोसाइड जीएम1 को क्रमशः इम्यूनोसाइटोकेमिकल और फ्लोरोसेंस विश्लेषण द्वारा प्रमाणित किया गया। डीआरएम और गैर-डीआरएम अंशों को ऑप्टिप्रेपटीएम घनत्व ढाल द्वारा अलग किया गया। फ्लोरोमेट्री द्वारा कोलेस्ट्रॉल, पेरोक्सीडेज प्रतिक्रिया द्वारा जीएम1, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा प्रोटीन सामग्री और गैस क्रोमैटोग्राफी द्वारा फैटी एसिड प्रोफाइलिंग निर्धारित की गई।

परिणाम: 59.2 ± 4.3% ताजे शुक्राणुओं के एक्रोसोम में कैवोलिन-1 का प्रमाण मिला, और कैपेसिटेशन के बाद रंगीन कोशिकाओं का अनुपात बढ़ गया (P<0.05)। GM1 सभी शुक्राणुओं के पोस्ट-एक्रोसोम और पूंछ में पाया गया, और कैपेसिटेशन के बाद कोई परिवर्तन नहीं पाया गया। कोलेस्ट्रॉल और GM1 पूरे ग्रेडिएंट में वितरित किए गए, जिसमें DRM अंशों में एक शिखर था। DRM अंशों में संतृप्त वसा अम्लों का उच्च अनुपात (P<0.001) पाया गया, जिसकी पुष्टि असंतृप्ति सूचकांक और उच्च लिपिड/प्रोटीन अनुपात द्वारा की गई। इन विट्रो कैपेसिटेशन ने DRM (P<0.001) और गैर-DRM (P<0.01) दोनों अंशों में संतृप्त वसा अम्लों की मात्रा में कमी को प्रेरित किया। एक्रोसोम प्रतिक्रिया के बाद DRMs में पॉलीअनसेचुरेटेड फैटी एसिड बढ़ गए। सभी उपचारों के परिणामस्वरूप DRM (P<0.01) और गैर-DRM अंशों (P<0.001) में कोलेस्ट्रॉल और प्रोटीन की मात्रा कम हुई, और DRMs (P <0.05) में GM1 की मात्रा अधिक रही। निष्कर्ष: ग्रेडिएंट के एक असतत क्षेत्र में लिपिड राफ्ट-जैसे माइक्रोडोमेन को अलग किया गया। संतृप्त वसा अम्लों की उनकी उच्च सामग्री एक अत्यधिक व्यवस्थित वातावरण प्रदान करती है। इन विट्रो कैपेसिटेशन और एक्रोसोम प्रतिक्रिया के दौरान उनकी संरचना संशोधित होती है।
सामान्य महत्व: ये परिणाम मेढ़े के शुक्राणु DRM के पहले लक्षण वर्णन का प्रतिनिधित्व करते हैं, और शुक्राणु निषेचन क्षमता अधिग्रहण तंत्र की बेहतर समझ में योगदान दे सकते हैं।