फार्मास्युटिका एनालिटिका एक्टा

अमूर्त

अमोनिया-एडक्ट संवर्धित चयनित आयन मॉनिटरिंग लिक्विड-क्रोमैटोग्राफी पॉजिटिव इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण मास स्पेक्ट्रोमेट्री परख का उपयोग करके चूहे के मस्तिष्क मोनोएसाइलग्लिसरॉल लाइपेस गतिविधि का प्रोफाइलिंग

गैरी डब्ल्यू कैलडवेल और वेनशेंग लैंग

2-एराकिडोनोयलग्लिसरॉल (2-AG) केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में प्रमुख एंडोकैनाबिनोइड्स में से एक है। मस्तिष्क मोनोएसाइलग्लिसरॉल लाइपेस (MAGL) गतिविधि के चयनात्मक अवरोध द्वारा केंद्रीय एंडोकैनाबिनोइड्स सिग्नलिंग का अपरेगुलेशन दर्द, मोटापा और मधुमेह मॉड्यूलेशन में एक संभावित चिकित्सीय दृष्टिकोण है। इस प्रकार, मस्तिष्क में एंडोकैनाबिनोइड स्तरों के निर्धारण के लिए एक संवेदनशील और विश्वसनीय विश्लेषणात्मक विधि MAGL अवरोधकों की खोज के लिए आवश्यक है। लिक्विड क्रोमैटोग्राफी पॉजिटिव इलेक्ट्रोस्प्रे आयनीकरण मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी / + ईएसआई / एमएस) और टेंडेम एमएस का उपयोग करके मोनोएसाइलग्लिसरॉल्स (एमएजी) के स्तर का सटीक माप एक चुनौती है क्योंकि अध्ययन के जीवन के चरण में मस्तिष्क के एंडोकैनाबिनोइड न केवल तनाव के प्रति संवेदनशील होते हैं, बल्कि पोस्टमॉर्टम मेटाबोलिज्म, एसाइल माइग्रेशन (यानी, 2-एमएजी से 1(3)-एमएजी में रूपांतरण), धातु एडक्ट आयन गठन और रासायनिक हाइड्रोलिसिस के प्रति भी प्रवण होते हैं, जो लक्ष्य एंजाइम द्वारा बनाए गए उत्पादों के समान ही उत्पाद उत्पन्न करते हैं। इन कलाकृतियों से बचने के लिए, हमने चयनित आयन मॉनिटरिंग मोड (एसआईएम) में प्रमुख एमएजी के अमोनियम-एडक्ट कैटायनों का प्रत्यक्ष पता लगाने के लिए एक सरल एलसी / + ईएसआई / एमएस विधि विकसित की है। इन-विवो अध्ययनों के लिए MAGs के पोस्टमॉर्टम मेटाबोलिज्म और आइसोमेराइजेशन को कम करने के लिए, चूहे के मस्तिष्क को मस्तिष्क ऊतक के प्रत्येक ग्राम के लिए चार मिलीलीटर इथेनॉल में सीधे होमोजेनाइज़ किया गया और व्यापक एंडोकैनाबिनोइड प्रोफाइलिंग के लिए एक रैखिक LC ग्रेडिएंट इल्यूशन लागू किया गया। SIM LC / +ESI / MS विधि को MAGL और फैटी एसिड एमाइड हाइड्रोलेस (FAAH) अवरोधकों की निरोधात्मक क्षमता के इन-विट्रो मस्तिष्क मूल्यांकन और लक्ष्य जुड़ाव अध्ययनों के लिए इन-विवो मस्तिष्क मूल्यांकन के लिए उपयोगी दिखाया गया है।