जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

वयस्क चूहों के फाइब्रोब्लास्ट से मुक्त-वायरल पुनःक्रमित स्टेम सेल-व्युत्पन्न डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स के लिए संभावित कैंसर जोखिम का पता नहीं चला

लियू जी

उद्देश्य: दैहिक कोशिकाओं के पुनर्प्रोग्रामिंग के माध्यम से स्टेम सेल प्रतिस्थापन चिकित्सा न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों और व्यक्तिगत चिकित्सा के लिए एक महत्वपूर्ण संभावित चिकित्सा है। चूंकि वायरस ले जाने वाले पुनर्प्रोग्रामिंग जीन ट्यूमर गठन के लिए काफी जोखिम देते हैं, इसलिए वर्तमान दृष्टिकोण वायरल पैटर्न को गैर-वायरल सिस्टम से बदलने की ओर प्रवृत्त होते हैं। हालाँकि, इन पुनर्प्रोग्रामिंग जीन के ऑन्कोजेनिक गुणों के बारे में अभी भी बहुत चिंता है। वर्तमान में कोई प्रत्यक्ष प्रमाण यह सत्यापित नहीं कर सकता है कि गैर-वायरल सिस्टम पुनर्प्रोग्रामिंग के बाद अंतिम उत्पादों में जीनोमिक डीएनए एकीकरण और उत्परिवर्तन घटनाओं को प्रभावित नहीं करते हैं।
तरीके: हमने चार पुनर्प्रोग्रामिंग जीन वाले एक अद्वितीय गैर-वायरल वेक्टर का उपयोग करके पुनर्प्रोग्राम किए गए स्टेम सेल-व्युत्पन्न डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स के संभावित कैंसर जोखिम का मूल्यांकन किया। वयस्क चूहों के फाइब्रोब्लास्ट से 50 दिनों की सेल संस्कृति के बाद पुनर्प्रोग्राम किए गए स्टेम सेल-व्युत्पन्न डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स अंतिम उत्पाद थे। 6 महीने की संस्कृति के बाद, इन कोशिकाओं का कैंसर के जोखिम के लिए मूल्यांकन किया गया।
परिणाम: समग्र कैंसर जोखिम आकलन की जाँच सबसे पहले कई स्टेम सेल बायोमार्कर का उपयोग करके की गई। हमने इन बायोमार्करों की किसी भी अति अभिव्यक्ति का पता नहीं लगाया। इसके अलावा, हमने मूल्यांकन किया कि बड़े पैमाने पर सेल संस्कृति में 6 महीने के बाद सबसे महत्वपूर्ण न्यूरोट्रांसमिशन कारक व्यक्त किए गए थे या नहीं। हमारे परिणामों ने निर्धारित किया कि डोपामाइन संश्लेषण में दर-सीमित एंजाइम के रूप में टायरोसिन हाइड्रॉक्सिलेस (TH) की केवल मजबूत जीन अभिव्यक्ति का पता लगाया गया था। इसके अलावा, TH-पॉजिटिव डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स के अंतिम उत्पाद की पुष्टि TH जीनोमिक DNA को अनुक्रमित करके की गई थी। हमारे डेटा ने सुझाव दिया कि चार पुनर्प्रोग्रामिंग जीन में से कोई भी मेजबान कोशिका के जीनोमिक DNA में एकीकृत नहीं हुआ और TH जीनोमिक DNA से संबंधित जीन अनुक्रमण के बाद कोई अन्य उत्परिवर्तन घटनाएँ नहीं हुईं, जो दो-छोर वाले आंशिक अनूदित क्षेत्रों के साथ 13 पूर्ण कोडिंग एक्सॉन से संबंधित थीं।
निष्कर्ष: पुनर्प्रोग्राम किए गए वयस्क माउस फाइब्रोब्लास्ट-व्युत्पन्न डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के लिए संभावित चिकित्सा के रूप में एक सुरक्षित तकनीक और दृष्टिकोण साबित हुए।