जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

मूषक भ्रूण स्टेम कोशिकाएं अपने स्वयं के विभेदन को बढ़ावा देने के लिए रेटिनोइक एसिड का संश्लेषण करती हैं

फ्रांसेस्को नेरी, कैटरिना डी क्लेमेंटे, मौरिज़ियो ऑरलैंडिनी, क्लाउडिया लेंटुची, फ्रांसेस्का एंसेलमी और फेडेरिको गैल्वाग्नि

उद्देश्य: भ्रूण स्टेम सेल (ESC) की बहुलता को विभिन्न सिग्नलिंग मार्गों और प्रतिलेखन कारकों के एक नेटवर्क के जटिल परस्पर क्रिया के माध्यम से बनाए रखा जाता है। हालाँकि इस बहुलता स्व-नवीकरण सर्किटरी के बारे में बहुत कुछ ज्ञात है, लेकिन आणविक घटनाएँ जो ESC को बहुलता से बाहर निकलने और भेदभाव शुरू करने के लिए प्रेरित करती हैं, वर्तमान में कम ज्ञात हैं। ऑल-ट्रांस रेटिनोइक एसिड (atRA), भ्रूण के विकास और ESC भेदभाव में महत्वपूर्ण और बहुल भूमिका निभाता है। वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य ESC द्वारा atRA के ऑटोक्राइन संश्लेषण की जाँच करना, भ्रूण निकायों (EBs) के रूप में ESC के स्वतःस्फूर्त भेदभाव में इसकी भूमिका का परीक्षण करना और atRA संश्लेषण मार्ग में शामिल एंजाइमों और प्रोटीन की अभिव्यक्ति का विश्लेषण करना है।

विधियाँ: ईएससी, अविभेदित या ईबी के रूप में विभेदित, एटीआरए, रेटिनॉल या आरएआर प्रतिपक्षी सीडी2665 की अनुपस्थिति या उपस्थिति में उगाए गए, और ब्रैच्युरी अभिव्यक्ति का विश्लेषण ईएससी विभेदन अवस्था के मार्कर के रूप में किया गया। ईएससी या ईबीएस-वातानुकूलित माध्यम को रेटिनॉल की अनुपस्थिति या उपस्थिति में उत्पादित किया गया और आरएआरई-ल्यूसिफ़ेरेज़ रिपोर्टर कोशिकाओं पर परीक्षण किया गया। एटीआरए बायोसिंथेटिक मार्ग घटकों का आरटी-क्यूपीसीआर विश्लेषण अविभेदित या विभेदित ईएससी पर किया गया। अंत में, ईएससी में प्रत्यक्ष एटीआरए लक्ष्य जीन की पहचान करने के लिए माइक्रोएरे जीन अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल का उपयोग किया गया।

परिणाम: यहाँ, हम प्रदर्शित करते हैं कि atRA ESC विभेदन के प्रारंभिक चरणों को बढ़ावा देता है, और यह कि ESC स्वतःस्फूर्त विभेदन के दौरान EBs के रूप में atRA को संश्लेषित करने की अपनी क्षमता को बढ़ाता है, RDH1, RDH10, ADH3, RALDH2, और CRABP2 को ऊपर-विनियमित करता है। ESC में atRA द्वारा विनियमित 35 प्रतिलेखन कारकों (TFs) में से, 3 TFs ऊपर-विनियमित (Snai1, Gata6, Cdx1) ESC प्लुरिपोटेंसी निकास में शामिल होने के लिए जाने जाते हैं और 3 TFs नीचे-विनियमित (Otx2, Id2 और Arid1a) ESC प्लुरिपोटेंसी बनाए रखने में शामिल हैं।

निष्कर्ष: ईएससी की खेती और नियंत्रित भेदभाव ने पुनर्योजी चिकित्सा और विकास के जीव विज्ञान दोनों में नई सीमाएँ खोली हैं। यहाँ, हमने दिखाया कि आरए को ईएससी द्वारा सहज भेदभाव के दौरान ईबी के रूप में संश्लेषित किया जाता है और अपनी खुद की भेदभाव प्रक्रिया को बढ़ावा देने के लिए एक सक्रिय भूमिका निभाता है।