जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

माउस भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं में विभेदित होने के बाद सार्कोजेनेसिस क्षमता प्राप्त करते हैं

गुप्ता ए, कर्टोविक एस, एनजी टीटी, त्सुयोशी टी, नरवानी के, बियानकोटी जेसी, स्पुरका एल, फुनारी वी, बाल्ज़र बी, तालावेरा-एडम डी और डेफो ​​डीसी

इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं का प्रचुर स्रोत मधुमेह के उपचार के लिए आइलेट प्रत्यारोपण की सफलता को बढ़ाएगा। इंसुलिन उत्पादक कोशिकाएँ मानव फाइब्रोब्लास्ट से प्राप्त की जा सकती हैं, जिन्होंने मेसेनकाइमल स्टेम सेल (MSC) फेनोटाइप प्राप्त किया है। हालाँकि, ये MSC परिवर्तन के बाद सारकोमा को जन्म देने में सक्षम हैं। हमारा उद्देश्य यह जांचना था कि क्या माउस भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट (MEF) इंसुलिन उत्पादक कोशिकाओं में विभेदित होने के बाद सारकोजेनेसिस क्षमता प्राप्त करता है। हमने MEF सेल लाइन MMMbz से इंसुलिन उत्पादक कोशिकाएँ प्राप्त कीं। विभेदन के बाद, कोशिकाओं को इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री (ICC), मात्रात्मक RT-PCR (qRT-PCR), और आनुवंशिक माइक्रोएरे द्वारा सेल अलगाव, विस्तार और लक्षण वर्णन के लिए चूहे इंसुलिन प्रमोटर (INS-GFP) द्वारा संचालित हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) के साथ लेबल किया गया था। फिर इन कोशिकाओं को FACS सॉर्ट किया गया और सेल व्यवहार का मूल्यांकन करने के लिए SCID चूहों के किडनी कैप्सूल के नीचे प्रत्यारोपित किया गया। IHC द्वारा ग्राफ्ट की गई कोशिकाओं का विश्लेषण किया गया। MMMbz ने प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक रिसेप्टर अल्फा (PDGFR-α) और नेस्टिन को व्यक्त किया। विभेदन के बाद, गैर-सॉर्टेड कोशिकाओं की तुलना में सॉर्टेड कोशिकाओं में बीटा-सेल मार्करों की उच्च अभिव्यक्ति पाई गई। जेनेटिक माइक्रोएरे ने कैंसर मार्गों की सक्रियता के साथ-साथ अग्नाशय और मेसेनकाइमल मार्करों की अभिव्यक्ति की पुष्टि की। प्रत्यारोपण के 30 दिनों के भीतर, सभी प्रत्यारोपित चूहों में अविभेदित सारकोमा विकसित हो गया, जिसने इंसुलिन-उत्पादक कोशिका कार्य के आगे के आकलन को बाधित कर दिया। इसलिए, इंसुलिन-उत्पादक कोशिका रेखाएँ माउस भ्रूण फाइब्रोब्लास्ट से इन विट्रो में प्राप्त की जा सकती हैं जो MSCs के रूप में व्यवहार करती हैं लेकिन सारकोजेनेसिस क्षमता को रूपांतरित कोशिकाओं की उप-जनसंख्या द्वारा प्रदान किया जा सकता है।