जर्नल ऑफ़ स्टेम सेल रिसर्च एंड थेरेपी

अमूर्त

miRNA लेंटिवायरल वेक्टर एकीकरण और कार्डियक प्रोजेनीटर में जीन लक्ष्यीकरण प्रभावकारिता

मारियाना लोपरफिडो, स्टेफ़ानिया क्रिप्पा और मौरिलियो संपाओलेसी

स्टेम और प्रोजेनिटर कार्डियक कोशिकाएं संभावित सेल थेरेपी एप्लिकेशन के लिए चुनौतीपूर्ण हैं। कई शोध प्रयोगशालाएं अवांछित दुष्प्रभावों के लिए जिम्मेदार प्रतिरक्षा दमनकारी उपचारों से छुटकारा पाने के लिए ऑटोलॉगस सेल थेरेपी दृष्टिकोण की व्यवहार्यता का दोहन कर रही हैं। हाल ही में, हमने दिखाया कि Sgcb शून्य चूहों से अलग किए गए कार्डियक प्रोजेनिटर, अंग-गर्डल मस्कुलर डिस्ट्रॉफी टाइप 2E के पशु मॉडल, miR669 के डिसरेग्यूलेशन के कारण इन विट्रो और इन विवो में एक असामान्य भेदभाव से गुजरते हैं । यह miRNA परिवार सीधे MyoD 3' UTR को लक्षित करने वाले कंकाल मायोजेनिक प्रोग्राम को बाधित करने में सक्षम है। लेंटिवायरल तकनीक का उपयोग करके हमने सबूत दिए कि जीन सुधार के बिना miRNA669 ओवरएक्सप्रेशन द्वारा डिस्ट्रोफिक एबेरेंट फेनोटाइप को बचाना संभव है। हालाँकि, ट्रांसडक्शन पर जीनोम में miRNAs ले जाने वाले वायरस कैसे स्थित थे और उनका स्थानीयकरण स्थल बचाव क्षमता को कैसे प्रभावित कर सकता है, इसका विश्लेषण नहीं किया गया था। यहाँ हम Sgcb कार्डियक प्रोजेनिटर से प्राप्त संक्रमित पॉलीक्लोनल और क्लोनल आबादी में प्री-miR669 ले जाने वाले लेंटिवायरल वेक्टर के एकीकरण प्रोफ़ाइल की जाँच करते हैं। हमारे अध्ययन से पता चलता है कि रेट्रोवायरल सम्मिलन स्थल (RIS) काफी हद तक कोडिंग जीन (65%) तक सीमित हैं। हालाँकि हमारे विश्लेषण की सीमाओं के साथ, हमें कैंसर से संबंधित जीन के लिए कोई हिट नहीं मिला और कई अनुक्रमित RIS ने मुख्य रूप से मांसपेशियों के कार्य में शामिल जीन को प्रकाश में लाया। इस प्रकार हमारा डेटा दिखाता है कि लेंटिवायरल वेक्टर सम्मिलन प्रोफ़ाइल सेल-विशिष्ट है, हालाँकि, लक्ष्य कोशिकाओं की क्रोमेटिन स्थिति वायरल एकीकरण को सकारात्मक रूप से प्रभावित करती है।