एडवांस्ड केमिकल इंजीनियरिंग जर्नल

अमूर्त

पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन/लिगेज डिटेक्शन रिएक्शन के अनुक्रमिक संचालन के लिए माइक्रोफ्लुइडिक रिएक्टर

मासाहिको हाशिमोतो, कज़ुहिको त्सुकागोशी, और स्टीवन ए. सोपर

हमने जीनोमिक डीएनए में एकल आधार उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए एक माइक्रोफ्लुइडिक बायोरिएक्टर विकसित किया है, जहां एक प्राथमिक पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) और एक एलीलस्पेसिफिक लिगेशन डिटेक्शन रिएक्शन (एलडीआर) अनुक्रम में आयोजित किए गए थे। प्राथमिक पीसीआर से बाद के एलडीआर पर कैरीओवर के प्रभाव की एलडीआर उपज और निष्ठा के संदर्भ में पूरी तरह से जांच की गई थी, और हमने पाया कि एलडीआर चरण में इसके समावेश से पहले एम्प्लीकॉन के लिए एक पोस्ट-पीसीआर उपचार आवश्यक नहीं था, जिसने हमें एलडीआर अभिकर्मकों के साथ पोस्ट-पीसीआर समाधान को ऑनलाइन मिश्रित करने के लिए एक सरल विसरित मिक्सर का उपयोग करने की अनुमति दी। हमने विसरित मिश्रण के लिए आवश्यक चैनल लंबाई का मोटे तौर पर अनुमान लगाने के लिए एक संख्यात्मक विश्लेषण भी किया। हमने अपेक्षाकृत उच्च प्रसंस्करण गति (कुल प्रसंस्करण समय = लगभग 28.1 मिनट) पर 1000 सामान्य अनुक्रमों में एक उत्परिवर्ती डीएनए का पता लगाने की प्रणाली की क्षमता को सफलतापूर्वक प्रदर्शित किया।